時間：2023-03-14 15:04:27
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科學發(fā)展觀是發(fā)展中國特色社會主義必須堅持和貫徹的重大戰(zhàn)略思想，也是人民法院工作特別是解決人民法院一系列重要問題的指導方針。深入開展好學習實踐科學發(fā)展觀活動，關鍵是要堅持“黨的事業(yè)至上”、“人民的利益至上”、“憲法法律至上”， 把促進社會和諧作為審判工作的最大政績，使人民法院隊伍建設和審判工作更加符合科學發(fā)展觀的要求。作為審監(jiān)庭庭長，我要努力在對科學發(fā)展觀的認識上取得新的突破，在解決群眾反映強烈、影響和制約科學發(fā)展的突出問題上取得新的進展，在改進司法工作作風上取得新成效。因此在今后工作中，我將從以下幾方面做起：
一、加強學習，提高自身素質。深入貫徹學習黨的十七大精神，認真深入學習實踐科學發(fā)展觀活動和“大學習、大討論”活動，提高學習積極性，做到真學、真信、真用。通過學習，澄清模糊認識，確立正確觀念，增強大局意識，責任意識和服務意識。同時認真學習最新法律法規(guī)和司法理論，及時更新知識和理念，掌握司法改革最新動態(tài)，爭當知識型、學習型法官，使自己盡快成為工作上的好助手，業(yè)務上的好骨干。
二、強化監(jiān)督，依法履行職責。面對新形勢下的機遇與挑戰(zhàn)，要進一步強化科學理念，以全新的姿態(tài)，全新的面貌，認真履行好崗位職責，形成整體合力，共同推進審監(jiān)庭各項工作邁上新的臺階。依法審理審監(jiān)庭的再審案件，進一步強化精品鐵案意識，提高辦案質量和效率。嚴格案件的質量監(jiān)督檢查，抓細、抓實。每月對全院收結案情況，審判人員辦案數(shù)、調撤率、服判率、實際執(zhí)行率等指標進行動態(tài)分析，對卷宗評查、裁判文書考評和庭審情況進行通報，并將監(jiān)督檢查的情況記入法官質量檔案及書記員技能檔案。通過月評查、月通報、月考核，兌現(xiàn)獎懲，確保案件審理的公開、公平、公正。主動接受人大及其常委會的法律監(jiān)督和工作監(jiān)督，主動接受輿論監(jiān)督和群眾監(jiān)督，切實提高依法辦案的水平。
三、以人為本，踐行司法為民。堅持“以人為本”，用發(fā)展的眼光、從和諧的高度依法審理審判監(jiān)督案件，積極運用“調解、和解、協(xié)調”方式，創(chuàng)新化解矛盾糾紛的方法，不斷提高自身審判藝術和駕馭庭審能力及化解矛盾糾紛的能力，為人民群眾提供公正、文明、高效、優(yōu)質的全方位法律服務。首先，要繼續(xù)貫徹“公正司法，一心為民”的指導方針，始終把維護人民群眾合法權益作為促進社會和諧的出發(fā)點和落腳點，自覺擺正法官同人民群眾和當事人的關系，切實解決人民群眾最關心、最直接、最現(xiàn)實的訴訟問題。其次，要牢固樹立社會主義法治理念，圍繞“公正與效率”主題，以積極向上、奮發(fā)有為的精神狀態(tài)，扎扎實實并富有創(chuàng)造性地做好審判工作，妥善審理涉及民生問題的案件，維護和諧的社會關系。第三，要樹立平等保護意識，依法保護當事人的合法權益，促進我縣經濟的又好又快發(fā)展。第四，落實各項便民訴訟措施，建立、完善便民訴訟機制，公開訴訟事項，加強訴訟調解，做好工作，努力提高審判效率及質量。
四、以身作則，發(fā)揮表率作用。作為庭長，我要在以下幾方面做庭室干警的表率：一是做學習的表率；二是做廉潔的表率；三是做勤政的表率；四是做遵章守紀的表率；五是做團結的表率。使自己成為帶頭學習的模范，勤奮工作的模范，奉公守法的模范，廉潔自律的模范，端正黨風和司法作風的模范。
一、科技政策
縣委、縣政府先后出臺了《關于科技興縣的決定》、《縣黨政領導科技進步目標責任制實施意見》、《關于增強自主創(chuàng)新能力，加快我縣創(chuàng)新體系建設的決定》、《縣關于科技創(chuàng)新“六個一”工程的實施意見》、《關于進一步加強人才隊伍建設的若干意見》、《縣“十二·五”科技發(fā)展規(guī)劃》和《縣重點產業(yè)科技專項資金管理暫行辦法》等一系列科技政策文件。
二、科技投入
2011、2012年縣本級科學技術投入分別為4543萬元和6558萬元，分別占當年縣本級財政決算支出的1.2%和1.34%，其中科技型中小企業(yè)技術創(chuàng)新基金18項，經費300萬元；專利資助資金50.25萬元，資助專利項目81個。兩年共有119個項目列入國家、省、市級科技計劃項目，爭取項目資金達3030萬元。
三、科技創(chuàng)新
兩年來，全縣新增高新技術企業(yè)6家，經重新認定的高新技術企業(yè)共15家；科技企業(yè)孵化器和創(chuàng)業(yè)園3家。全縣申請專利677件，其中發(fā)明專利232件；專利授權數(shù)448件，其中發(fā)明專利79件。同時，科技進步示范縣規(guī)劃建設、國家農業(yè)科技園區(qū)規(guī)劃建設、國家糧食豐產工程、科技富民強縣專項行動計劃續(xù)建項目和科技特派員工作也在有序實施和推進。
四、科技平臺
到2012年，全縣獨立科研技術開發(fā)機構有5家；省級以上工程技術（研究）中心達9家，其中：國家級3家，省級6家；省級科技創(chuàng)新團隊1家；經濟技術開發(fā)區(qū)成功晉級為國家級經濟技術開發(fā)區(qū)，園區(qū)內省級特色產業(yè)基地達3個，分別為汽車及零部件產業(yè)、食品飲料產業(yè)和生物醫(yī)藥產業(yè)，此外，全省首個千億建筑科技產業(yè)園也在緊張有序的建設。
五、科技機構
在2010年機構改革中，縣科學技術局仍保留為獨立的科技管理機構，正科級建制，是縣政府主管全縣科學技術工作的組成部門，掛縣知識產權局牌子。2012年縣科技局有在職人員14名，其中局長1名，副局長3名，副科級調研員2人，辦公室主任1人，科長3人，科員4人，本科以上學歷人數(shù)占57%。另有市科技（金融）入園工作站、縣生產力促進中心、縣科技入園工作站等科技服務機構。
一、景東大道工程建設。目前我們正在積極推動土地掛牌出讓，籌措資金，為連通陶陽北路支線，使之與朝陽路（東二路）形成循環(huán)道路，以拉開城市路網框架，項目部正在積極強抓梨樹園（跨皖贛鐵路線立交橋口）至小鐵路1.5千米道路的建設工作，目前道路下水道等三通一平工作已完成，路面鋪設施工正在進行之中。
二、白鷺大橋建設工程。已全面完成，并已經完成各項審計工作。
三、中華北路延伸工程。積極運作資金，推動項目步入良性發(fā)展軌道，下大力氣做好拆遷工作，堅決按時完成工程建設任務。
四、*洲城市污水處理工程。*洲城市污水處理廠一期項目已經完成，日處理能力4萬噸；并抓緊實施二期工程，完成后日處理達8萬噸。并采取切實可行措施，加大力度征收污水處理費。
五、人民公園周邊改造工程。全面推進公園周邊拆遷和安置房的建設工作；茶山安置地三通一平已經完成。并積極配合香港威時集團，打造具有瓷都特色居住小區(qū)。
六、景德鎮(zhèn)國際陶瓷銷售中心建設工程。目前，土地征用工作基本完成；建設工程立項已完成；高壓線走廊220、110、35KV線路改造方案初步確定，待政府審批后實施；已完成土石方工程招投標；正在同三閭廟村協(xié)商拆遷事宜，力爭盡快完成；并著手施工臨時排水設施。
七、推進城區(qū)路網建設。一是正進一步有計劃有步驟的做好對全市各項目部道路交接養(yǎng)護；二是全面完成對中山路、中華路全線改造，總長6409.47米；三是已經完成湖田大橋主體工程建設，現(xiàn)已通車；四是加快對全市240多條里弄的改造，現(xiàn)已完成約總工程量的70%，同時打造2條精品里弄；五是為緩解廣場周邊車輛擁堵狀況，已開工建設廣場周邊鋼架立交橋建設。
八、加強環(huán)衛(wèi)基礎設施建設。已基本完成29座旱廁改造工程，并從明年起實施公廁免費開放；添置900個果殼箱，正抓緊籌建方家山垃圾處理場。
我參與的課題是《農村留守兒童教育現(xiàn)狀及對策研究》，下面我從研究的過程、取得的成效、存在的困惑等方面做簡要匯報。
一、課題研究的過程
本課題研究是分三個階段進行。
第一階段（2017年4月～2017年8月），準備階段。
首先，我們在4月2日組織全體教師認真學習了國家、省市等有關關于做好農村留守兒童工作的文件，強化教師責任。提高認識，更新觀念，統(tǒng)一思想，形成共識。
4月11日，我們選取了6名有志于做課題研究的老師成立課題組，明確分工和職責，并著手對全校留守兒童進行調查登記，建立了各班級共63名留守兒童個人檔案。并對他們進行深入了解。
5月16日，我們召開了課題組成員會議，各人匯報所了解的各班級留守兒童行為品性、學習能力、生活習慣、心理健康等教育現(xiàn)狀，確立實驗內容，制定實驗研究方案。
5月23日，我們根據(jù)研究方案，進一步制定了學習制度、幫扶制度、考核與獎懲制度等相應的保障制度。
第二階段（2017年9月—2017年8月），研究階段。
收到立項通知書后，我們立刻與9月19日進行了傳達，并集體學習了有關問題學生教育的理論。
為進一步了解留守兒童的行為品性、學習能力、生活習慣、心理健康等現(xiàn)狀及影響的主要因素，課題組參考了有關資料于10月19日編制了問卷。問卷分為四個大部分，分別是，留守兒童的生活狀況、心理狀況、學習狀況、教育狀況。每項都設計了很多問題。問卷設計好后又請學校其他教師對問卷內容進行補充和完善。
10月24日，課題組成員對各班級留守兒童進行問卷調查，并利用期中考試后，學校開家長會的時機與留守兒童學生家長或者監(jiān)護人進行座談，進行隨機抽樣調查。
11月7日，我們對調查結果進行了統(tǒng)計分析，深入了解留守兒童行為品性（包括思想狀態(tài)、行為習慣、言行舉止）、學習能力（包括學習態(tài)度、學習方法、學習習慣、學習目的等）、生活習慣（包括飲食健康、自理能力、衛(wèi)生習慣、安全保障等）、心理健康（包括性格情感、自我認識、社會適應性等），經過認真分析，寫出了調查報告，初步總結出留守兒童教育現(xiàn)狀及轉變的方法。
接著又擬定測試卷，對留守兒童進行品學綜合測試，各班抽取2～3名得分較低的學生（智力正常）作為問題學生個案，并建立個案檔案，收集他們的評價材料（班主任、科任教師、家長、監(jiān)護人、同學的評價）、實物材料、檔案材料。找出問題留守兒童的教育問題，分析導致這種現(xiàn)狀的各種因素：主觀因素（學生自己的智力、行為、習慣因素等）、客觀因素（家長因素、監(jiān)護人因素、社會因素、教師因素、學生之間影響等）。然后我們討論商量對策：
主要有1.建好留守兒童之家，（一方面在學校中，我們還聯(lián)系有條件的村委會，例如西平村建立了留守兒童之家）開通親情電話、親情QQ，使留守兒童在課余有一個文化娛樂、交流感情的休閑場所。
2.開展主題班會、走進留守兒童之家等活動，全面了解留守兒童現(xiàn)狀，不斷發(fā)現(xiàn)新的情況，貼近學生，走近學生。邊實驗邊研究，讓留守兒童學得安心，生活開心，家長放心。
3.根據(jù)留守兒童現(xiàn)狀，分類指導，區(qū)別對待，在活動中受啟發(fā)，在交流中受教育，在相處中求愉悅，從個性中找共同點，從共性中找差異。探索出留守兒童教育的新方法，新措施。
經過一段時間的活動開展，我們總結出要搞好留守兒童的教育，重點做好了以下四個方面的工作
一是，構建了對留守兒童做到“四掌握”“四管理”，“當好五員”的教師管理辦法。
二是，搭建起了對留守兒童“三多”“三溝通”班級管理平臺。
三是，建成了對留守兒童學生“五個一”活動的學校管理機制。
四是，筑起對留守兒童學生“十個一項目”的系統(tǒng)管理工程。
第三階段（2018年9月—2018年4月），總結階段。
1.收集匯編研究資料；對課題研究的整體情況做細致的分析、總結，整理有關調查數(shù)據(jù)及材料，總結活動中的經驗、教訓，撰寫研究報告，總結出留守兒童的教育方案。
2.積極組織論文投稿；
3.完成結題報告；
4.課題結題鑒定。
下面說說課題研究成效：
1.學校辦學層次得到提升。促進了教師走向專業(yè)化，構建了平等合作、互相尊重的師生關系，促進了學生的全面發(fā)展。在課題研究過程中我校有1人次被評為市級教學能手，5人次被評為縣級教學能手，1人次獲得市級教學工作先進個人，3人次獲得縣級教學工作先進個人，1人次獲得市級優(yōu)秀教師，2人次獲得縣級優(yōu)秀教師，2人次在市級以上刊物，12人次學生作品在市級以上交流或獲獎。
2.學生成長得到了保障。挽救一些心靈受到傷害、扭曲的留守兒童，促進了留守兒童的健康成長。性格孤僻的變得開朗了；成績平平的變得優(yōu)秀了；脾氣浮躁的變得穩(wěn)重了。
3.家庭和諧得到維護。拯救了幾個瀕臨破碎的家庭，促進了社會的穩(wěn)定，有助于建設平安校園，和諧社會。
4.社會穩(wěn)定得到加強。對減少青少年犯罪、社會安定有積極的意義。同時也積累一些“留守兒童”的教育的經驗，為未成年人的研究提供一些素材、案例。
下面說說困惑或者希望
[關鍵詞]羥基磷灰石；殼聚糖；細胞相容性；人骨髓間充質干細胞
[中圖分類號]Q813.1[文獻標識碼]A[文章編號]1008-6455（2008）06-0855-04
Cellular biocompatibility of nature hydroxyaptite/chitosan composite
TANG Xiao-jun1，GUI Lai1，LV Xiao-ying2
（1.Department of Cranio-maxillofacial Surgery, Plastic Surgery Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College,Beijing 100144，China. 2. State Key Laboratory of Bioelectronics, School of Biological Science and Medical Engineering, Southeast University, Nanjing 210096,Jiangsu, China）
Abstract： Objective To investigate the cellular biocompatibility of nature Hydroxyaptite/ Chitosan composite（NHC）.MethodsThe composite was cocultured with osteoblasts derived from human bone marrow stem cells. The cellular biocompatibility was studied by means of the evaluation of proliferation capacity, alkaline phosphatase staining and scanning electron microscope observation.ResultsExcellent adherence and growth of osteoblasts were observed on the composite surface. There were no significant differences in both cell proliferation capacity and alkaline phosphatase staining between the experiment and control groups. SEM observation showed normal growth of osteoblasts and extracellular matrix generation in 24 hours. ConclusionNHC had good biocompatibility with the osteoblasts in vitro.
Key words：hydroxyaptite；chitosan；cellular biocompatibility；human bone marrow stem cells
天然羥基磷灰石／殼聚糖復合材料是由豬骨提取的羥基磷灰石和殼聚糖交聯(lián)法獲得的（該材料合成方法已獲得國家專利）[1]。其抗壓強度達到人椎骨水平。理論上本復合材料擁有羥基磷灰石良好生物相容性，引導骨形成，骨融合特性和殼聚糖的體內降解吸收，抗菌抗癌和良好的骨整合等特殊的醫(yī)用生物學特性[2]。作為一種新復合成的材料，我們需要對其進行生物相容性評定。該材料骨內植入的掃描電鏡情況已經發(fā)表[3]。本文主要是評價該材料在體外的細胞相容性。
1材料和方法
1.1實驗試劑和儀器：1∶50肝素抗凝的正常成人骨髓采自整形醫(yī)院臨床患者，經患者知情同意。患者無感染、血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)疾病等系統(tǒng)性疾患。Percoll（Amershan-Pharmacia公司），低糖型DMEM培養(yǎng)基（Gibco BRL公司），胎 牛 血 清（天津川葉生物公司），青、鏈 霉 素（華北制藥股份有限公司），胰酶（Amershan-Pharmacia公司），二氧化碳培養(yǎng)箱（FORMA 3111型美國），離心機（KUBOTA2100日本），倒置相差顯微鏡（LEICA DM IRB 德國），JSM-T300掃描電鏡，超凈工作臺YJ-875型（北京昌平凈化設備廠 國產），堿性磷酸酶試劑盒（北京中山生物公司產品），骨鈣素RT-PCR引物（賽百盛公司），AMV反轉錄試劑盒（promega），酶聯(lián)儀（TECAN SUNRISE日本）。
1.2人骨髓間充質干細胞的分離及培養(yǎng)：正常人1∶50肝素抗凝骨髓5ml，用含10％FBS的L-DMEM 1∶5稀釋離心1200 rpm 5min，去掉脂肪層，重懸細胞。用1.073g/mlPercoll分離，將密度為1.073g/ml Percoll先置于試管的底部，然后按照1∶1的比例緩慢滴加稀釋后的骨髓，離心 2500 rpm 30min，收集位于界面層的單個核細胞。用L-DMEM洗滌兩次，重新懸浮于含10% FBS的L-DMEM培養(yǎng)基中，接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，密度為2.0×105/cm2，置于37℃，含 5%CO2的培養(yǎng)箱內孵育。48h后除去非貼壁細胞，更換新鮮培養(yǎng)液。之后每3至4天換一次液。待貼壁細胞生長至90%匯合時，用0.25%胰蛋白酶消化，按1∶1比例傳代，第2代以后的細胞按1∶2或1∶3的比例傳代培養(yǎng)。
1.3人骨髓間充質干細胞的鑒定
1.3.1 MTT比色實驗測定細胞生長曲線：用0.25%胰蛋白酶消化單層培養(yǎng)細胞，用含10% FBS的L-DMEM配制成細胞懸液，以每孔1.5×104個的細胞密度接種于96孔板中，每孔體積200μl。將培養(yǎng)板移入CO2培養(yǎng)箱中，在37℃、5% CO2和飽和濕度條件下培養(yǎng)。分別于1、2、4、6、8、10和12天各取出三孔，每孔加入MTT 20μl，37℃孵育4h，中止培養(yǎng)，棄上清，每孔加150μl二甲基亞砜（DMSO），震蕩10min,使結晶物充分溶解，選擇490nm波長，在酶聯(lián)儀上測定各孔光吸收值（optical density value OD）。
1.3.2人骨髓間充質干細胞向成骨細胞的誘導分化能力的鑒定。
1.3.2.1 MSC向成骨誘導：取體外擴增的第3代MSCs，以3.0×103/cm2的濃度接種于放置有無菌處理的蓋玻片的六孔板中，每孔內加2ml含10% FBS的L-DMEM培養(yǎng)液。當細胞貼壁生長達到60%～70%匯合時，加入骨誘導劑100nM Dex、0.25mM AsA和 10mMβ-GP，進行誘導培養(yǎng)。對照組只加培養(yǎng)基。在第4、8、12和16天分別觀察各孔中細胞的形態(tài)學和組織化學變化情況。
1.3.2.2 堿性磷酸酶活性測定：按堿性磷酸酶試劑盒說明進行操作。取進行誘導后的MSCs的上清液進行測定，分別取4、8、12和16天 4個時間點測定。
1.3.2.3 RT-PCR分析骨鈣素mRNA：人MSC在對照組和含誘導劑培養(yǎng)基中分別培養(yǎng)7天和14天。消化后收集細胞，采用QIAGEN公司的RNeasy mini column 試劑盒提取總RNA。提取后的RNA標本經測定OD 260/280 測定比值為2.0～2.1。取1μg總RNA采用mRNA Selective PCR試劑盒進行RT-PCR反應，方法按使用說明書進行。45℃ 30min反轉錄，各取10μl的cDNA作為模板進行PCR反應，反應條件為：94℃30s,58℃30s，72℃1min，35個循環(huán)，72℃延伸10min。產物在1%瓊脂糖凝膠上電泳。
1.3.3 人骨髓間充質干細胞向脂肪細胞的誘導分化能力的鑒定：將hMSC接種于24孔板中，每孔細胞數(shù)為4×104個。24h后添加脂肪細胞誘導液，為高糖DMEM，內含10%FBS、0.5mmol/L異丁基-甲基黃嘌呤、0.2mmol/L吲哚美辛、10-3mmol/L地塞米松、10mg/ml胰島素。誘導2周，每周換液2次。2周后棄去培養(yǎng)基，PBS洗滌3次，10%福爾馬林固定，油紅O染色。
1.4 天然羥基磷灰石/殼聚糖復合材料復合細胞培養(yǎng)：將支架材料制成厚0.2cm，直徑1cm的圓片狀，雙蒸水清洗，室溫下自然干燥24h，紙塑包裝密封，環(huán)氧乙烷消毒。
1.4.1人骨髓間充質干細胞（hMSCs）在天然羥基磷灰石/殼聚糖復合支架材料上的貼附實驗：無菌條件下在超凈臺上將消毒的材料圓片放入24孔板，將體外擴增的hMSC經過消化離心，得到細胞懸液，按細胞密度2×l06/cm2均勻接種在材料上。加入含有10%胎牛血清的低糖DMEM培養(yǎng)基，置入細胞培養(yǎng)箱內培養(yǎng)4～6h。
1.4.2 MTT法分析hMSCs與天然羥基磷灰石/殼聚糖復合支架材料復合培養(yǎng)的成活率和增殖能力：將傳至第3代的細胞以1×104/ml接種于96孔培養(yǎng)板, 每孔加入培養(yǎng)基200μl,37℃, 5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng), 分別于第2、4、6及8天,每孔加入MTT20μl，繼續(xù)培養(yǎng)4h，吸出培養(yǎng)液后，加入DMSO液(150μl/孔)，室溫下于微孔板振蕩囂上振蕩10min，使結晶物溶解，在酶標儀上檢測各孔的A值(選擇波長570nm)。統(tǒng)計學方法對所測數(shù)據(jù)進行方差統(tǒng)計分析。
1.4.3堿性磷酸酶(ALP)活性測定：將支架材料3塊置于六孔培養(yǎng)板,并設3孔為不加材料的空白對照組。將hMSCs以1×105/孔接種于預濕材料上，在條件培養(yǎng)基下(含抗壞血酸、地塞米松和甘油磷酸鈉)培養(yǎng)3周后，收集細胞，采用磷酸苯二鈉法測定樣品ALP活性。
1.4.4掃描電鏡觀察：hMSCs-支架材料復合體標本取出后用2%戊二醛固定，系列丙酮中脫水，乙酸異戊酯置換，臨界點干燥，表面噴金，用JSM-T300掃描電鏡觀察細胞與材料貼附和基質分泌及生長情況。
2結果
2.1采用密度梯度離心法成功分離獲得了MSCs。用密度為1.073g/ml的Percoll對骨髓進行密度梯度離心，經過2,500rpm 30min離心后，分離得到了富含MSC的單個核細胞，將其接種于含10％經過篩選的FBS的培養(yǎng)基中，細胞于48h后貼壁，72h后出現(xiàn)紡錘狀細胞（圖1），6～12天細胞生長迅速，貼壁的MSCs平均約12天后形成克?。▓D2），兩周左右細胞近80%～90%匯合，出現(xiàn)致密的貼壁層（圖3）。
2.2 MSC的生長曲線（圖4）
2.3 MSCs向成骨細胞誘導分化
2.3.1 MSCs向成骨細胞誘導分化過程中的形態(tài)學變化：本實驗采用包含有100nM Dex、0.25mM AsA和10mMβ-GP的骨誘導液進行MSCs向成骨細胞定向分化的實驗研究。應用Von Kossa 染色和X光衍射等方法對誘導后的細胞表型進行檢測和鑒定。在16天的誘導過程中，細胞形態(tài)發(fā)生明顯的變化，與對照組有顯著差別。在進行骨誘導第2天時，細胞形態(tài)發(fā)生改變，第4天更為明顯，大約30%～40%的MSCs由紡錘狀變?yōu)榱⒎叫停坏?天時，實驗組大約80%以上的MSCs成為立方形或多角形，細胞基質中出現(xiàn)鈣化斑；第12天時，實驗組培養(yǎng)皿中廣泛均一地形成骨樣物質，礦化物形成明顯，并且開始形成多層小結結構；第16天時，成骨誘導組細胞基質形成廣泛的礦化，并形成鈣化結節(jié)（圖5）。而對照組細胞形態(tài)仍然是紡錘狀。
2.3.2 RT-PCR分析骨鈣素mRNA：RT-PCR分析，在7天、14天時誘導組中骨鈣素的表達明顯增高（圖6）。
2.4 MSCs向脂肪細胞誘導分化：原代培養(yǎng)的MSC呈集落樣增殖,細胞呈長梭形或長三角形,類似成纖維細胞。傳代細胞第3～5代形態(tài)逐漸趨于均一的長梭形，核位于中央，細胞分布均勻。誘導36～48h后,光鏡下可見部分細胞沿胞膜下出現(xiàn)環(huán)形細顆粒層，折光性較強，細胞核仍位于中央，以后顆粒逐漸增多，并向細胞中央、核周圍逼近，顆粒逐漸變大；細胞仍呈長梭形,但胞體變大和變寬，細胞兩極變短（圖7），油紅O染色證實這些顆粒為中性脂肪顆粒。2～6天后，顆粒細胞明顯增多，分化較早的細胞，在細顆粒增多的同時，顆粒逐漸融合成光鏡下可見的小圓形脂滴，晶瑩透亮，整個細胞內從胞膜到細胞核之間充滿大小較均一的脂滴，呈葡萄串狀(圖8)，胞體明顯變大，并趨于橢圓形。
2.5統(tǒng)計測定
2.5.1 hMSC增殖度測定：隨著培養(yǎng)時間的延長,各組細胞數(shù)量都有所增加，各組細胞增殖度差異無顯著性(P＞0.05)。見表1。
2.5.2堿性磷酸酶(ALP)活性：材料組ALP活性為(2.1259±0.1094)，空白對照組為(2.1337±0.1101)，材料組與對照組之間無顯著性差異(P＞0.105)，說明材料對hMSCs進行成骨細胞誘導未見不利的影響，且對誘導的成骨細胞的ALP活性沒有影響。
2.5.3掃描電鏡：材料表面在掃描電鏡下為微粒狀，具有微孔(圖9)。培養(yǎng)4h，細胞附著于材料表面，形態(tài)多樣，呈有多個突起的梭形或多角形，細胞間連接松散，細胞跨越微孔表面或向孔內長入(圖10)。培養(yǎng)8h后細胞連接成片，可見細胞表層有絲狀纖維形成(圖11)。培養(yǎng)24h后細胞形成單層結構，細胞緊密，可見到細胞外基質（圖12）。
3討論
細胞相容性是組織工程對支架材料的最基本的要求之一。細胞培養(yǎng)法檢測材料細胞相容性是一種快速、簡便、重復性好又價廉的方法，在材料生物相容性評價中起著越來越重要的作用。體外材料復合細胞培養(yǎng)進行細胞相容性試驗可以排除體內試驗的各種復雜因素之間的相互干擾?？梢詮募毎街苯佑^察某一單一因素所致的細胞與生物材料復合生長的情況，可以直接觀察細胞對材料的趨化、粘附和細胞在材料表面及內部的生長、增殖和分化。結果較敏感和客觀。
3.1細胞相容性試驗中的細胞選擇：1948年Rosen Bluth等首次報道利用鼠成纖維細胞培養(yǎng)來篩選聚合物，進行細胞毒性試驗評價生物材料的生物相容性的研究。目前一般多選用成纖維細胞株(如L-929)作為實驗細胞[4]。越來越多學者認為不同組織來源的細胞對材料的敏感性是有差異的[5]，應該根據(jù)材料植入體內的不同部位及使用目的選擇人體不部位或/和組織來源的細胞實驗細胞，使體外細胞培養(yǎng)對機體內環(huán)境的模擬更趨真實，其結果更為準確與客觀。由于我們研究的材料為骨替代材料最終是要被種植到骨組織內，需要長期和骨組織進行生物學接觸。因此骨替代材料應選擇骨組織來源的細胞才能準確反映材料最終在生物體內的真實狀況。比如：成骨細胞，或前體成骨細胞等[6]。
3.2復合材料細胞相容性：材料和細胞相容性有很多的影響因素，比如：金屬材料基質能，表面自由能，界面自由能，材料表面的粗糙程度[7]，材料表面基團種類和結構, 表面電荷, 材料表面的改性和修飾情況等等因素。Baier[8]等認為材料表面的特性和自由能決定其細胞生物粘附性，他們通過在新西蘭白免體內移植幾種不同表面能的金屬材料發(fā)現(xiàn),低表面能材料粘附的細胞呈現(xiàn)球形或近球形,粘附作用極弱。高表面能材料的表面可以被活體細胞完全覆蓋,表面粘附的細胞呈現(xiàn)出扁平、拉長的形態(tài),粘附作用很強。因此高表面能材料的表面更有利于細胞的粘附與鋪展。生物材料表面的化學結構，表面基團或改性修飾對細胞的粘附和生長是另一個重要因素。Lee[9]等認為材料表面不同功能基團具有不同的細胞特性，比如羧基、羥基、磺酸基、胺基、亞胺基及酰胺基等基團可促進細胞的粘附和生長。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp，RGD）肽表面修飾對HA材料的細胞相容性有明顯的優(yōu)化作用[10]。并且在生理狀態(tài)下，一切脊椎動物細胞表面都帶有分布不均勻的負電荷。因此我們認為帶正電荷的材料表面與帶負電荷的細胞之間的靜電吸引作用有利于細胞的粘附。
在本實驗中，將復合材料和成骨細胞在體外進行復合培養(yǎng)，通過電鏡形態(tài)學對材料和細胞復合檢查發(fā)現(xiàn)細胞在材料表面生長活躍，培養(yǎng)早期細胞散在于材料表面，呈有多個突起的梭形或多角形，細胞間連接松散。隨培養(yǎng)時間延長，細胞增殖，連接成單層或生長附著于較大孔隙表面，細胞排列緊密，部分區(qū)域有細胞外基質形成。即4h細胞貼附生長，8h連成片狀，24h細胞在材料表面形成單層或長入孔隙內，同時有細胞外基質分泌。這說明骨髓基質細胞可以在材料表面貼附生長，并伸入材料之中，可在材料表面及內部伸展和繁殖，保持細胞的梭形形態(tài)，并能分泌膠原纖維和鈣離子顆粒等細胞外基質。本實驗也同時應用MTT法對細胞增殖進行檢測，發(fā)現(xiàn)與天然羥基磷灰石/殼聚糖復合材料復合培養(yǎng)的骨髓基質細胞其增殖不受影響，表明該材料對骨髓基質細胞的生長分裂無明顯的干擾作用。通過ALP測定進一步檢測該材料對細胞功能狀態(tài)的影響，ALP是成骨細胞分化成熟的重要標志，被認為與成骨細胞的分化有密切關系。本實驗顯示，實驗組和對照組ALP活性均有增高，同期比較差異無顯著性。說明這種生物材料不僅對骨髓基質細胞的增殖無明顯阻滯作用,同時對細胞的功能尤其是對于骨髓基質細胞向成骨細胞轉化無明顯影響。由上述實驗結果可得出該材料具有良好的細胞相容性，無細胞毒性。可以作為骨組織工程研究中種子細胞的生物支架。但是這僅僅是在體外短期試驗的結果，該材料在生物體內具體反映如何仍需要進一步的試驗論證。
根據(jù)前述的影響生物材料細胞相容性的因素分析，考慮本實驗材料細胞良好相容性與以下因素有關。天然羥基磷灰石具有較高的結合鈣離子的能力，而局部鈣離子濃度的增加，可在材料表面形成高密度的正電荷層，有利于成骨細胞的粘附、生長和增殖。殼聚糖是可降解和可吸收的高分子材料，它表面具有較多的化學基團，可通過調節(jié)表面的親水性和本身的生理活性促進細胞的粘附和生長。殼聚糖也是自然界唯一的帶正電荷的多糖，可以和帶負電荷的細胞相互吸引，有利于細胞粘附。該材料的降解性有利于材料與機體之間的物質交換，材料表面殼聚糖成份的降解更為細胞的伸入提供了位置，對形成早期的骨性結合比較有利。從理論上我們推測本材料可能隨著殼聚糖的吸收，成骨細胞長入，骨組織形成逐漸長入、連接并和羥基磷灰石形成骨性愈合，最終實現(xiàn)完全的骨整合。
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一、完善科研制度，健全網絡，分工負責，責任到人：
本學期學校教科研組進一步完善和落實教科研管理制度：重新學習了教科研例會制度、課題實施定期匯報制度、課題成果總結推廣制度、教科研成果評比獎勵制度等，真正落實科研興校，使教育科研向更自覺的理性水平提升。根據(jù)學校實際情況建立了四個子課題小組，教科室責任到人，具體負責四個子課題組，并設立了新的課題組長，負責子課題的日常研究工作。
二、注重學習，加強課題的研究力度，完成中期匯報：
各課題組認真學習有關科研工作的學習材料，學習先進的教育理念，繼續(xù)做好教育科研的常規(guī)管理工作，加強課題的研究力度，抓實研究過程，在深入實施過程中做好階段性成果的匯總工作和資料積累工作。使課題的管理、實施、操作更規(guī)范、科學、有效。教師的研究更加主動、自覺、扎實。本學期在各教科組活動的基礎上，匯編出《八一小學教科研成果集》，結合教研組團隊活動，組織青年教師開展了中期課堂教學匯報課，受到了區(qū)教科室領導的肯定。教科室還完成了08年度課題匯報。評選校教科研組及先進個人。
筆者在十余年的科研活動中，陸續(xù)指導了近20名高職學生進行科研專題實習，深刻體會到科研專題實習模式有利于學生專業(yè)知識的鞏固與擴展，有利于學生實踐技能的應用與提升，有利于學生獨立思考習慣的養(yǎng)成，有利于學生創(chuàng)新思維的培養(yǎng)，有利于學生文字與表達能力的鍛煉，有利于學生團隊協(xié)作能力的提高。因此，筆者更加堅定地認為，科研專題實習模式是藥學高職實踐教學多元化模式中不可缺少的組成部分。
2高職藥學教育實施科研專題實習模式的可行性
當前，在一些高職院校中仍存在著“高職生不同于本科生，無需進行科研活動訓練”的觀點。表面上看，科研與高職生未來的就業(yè)方向與崗位工作不符，實際上是忽略了科研過程對高職生綜合能力的培養(yǎng)及對高職生今后職業(yè)發(fā)展的重要支撐作用。高職生的科研應側重于“應用型”而不是“學術型”，應注重應用技術或產品的開發(fā)而不是理論基礎研究。一方面，隨著高職教育的深入發(fā)展，對“雙師型”教師的要求不可能僅停留在擁有幾本證書的層面上，而是要求教師能深度融入企業(yè)的產品生產、研發(fā)等實踐活動中，能服務于周邊地區(qū)社會經濟發(fā)展。事實上，高職院校中部分教師已經在與企業(yè)進行校企合作的實踐活動中提高了實踐技能，也積累了豐富的科研經驗，具有指導學生從事科研活動的能力。此外，高職院校聘請了大批行業(yè)、企業(yè)中的技術骨干作為兼職教師，其中亦不乏可作為科研專題指導教師的人選。因此，在高職院校中正在不斷形成一支具備科研專題實習指導能力的師資隊伍。另一方面，無論哪種類型或層次的教育都不能批量地復制或制造人才，而要因人而異、因材施教，科研專題實習模式正是滿足這一條件的有效人才培養(yǎng)途徑?，F(xiàn)實中存在一批迫切想繼續(xù)深造的高職生，也存在部分對科研具有濃厚興趣與好奇心的高職生。對于這部分學生，科研專題實習模式將比頂崗實習更具有吸引力，也具有更強的現(xiàn)實意義。
3科研專題實習模式的實施
開展科研專題實習模式的基本出發(fā)點是基于對高職生的實踐、應用、創(chuàng)新等能力與綜合素質的培養(yǎng)。因此，應針對高職生基礎相對薄弱、就業(yè)崗位偏重實踐應用、獨立思維能力不足等特點，在專題內容、指導方式、組織實施等方面開展有異于本科院校的專題實習。
3.1師生篩選
師生篩選即對指導教師及學生的篩選。對于指導教師，應由具有中級以上職稱或具有研究生及以上學歷，并且有在研項目的教師擔任；對于學生，則采用自愿報名的原則，以欲參加專升本考試的學生為主，或選擇對科研感興趣、想在該方面有所提高的學生。另外，為了保證高職生科研專題實習的質量，應根據(jù)教師科研水平的高低來控制指導學生的數(shù)量，如可根據(jù)指導教師在研課題數(shù)及課題級別高低確定具體的學生數(shù)量，原則上一項課題安排一名學生，對研發(fā)資金規(guī)模較大的課題，允許安排多名學生。
3.2開題
為幫助學生明確研究目標、理清研究思路、預見可能碰到的問題,要求學生在教師的指導下，通過查閱相關文獻資料，形成文本材料并在課題組內以PPT的形式匯報。在報告會上,帶教教師應針對匯報細節(jié)，包括實驗設計思路、方法、儀器與試劑的準備以及實驗中應注意的操作問題等逐一進行點評。在此過程中，幫助學生發(fā)現(xiàn)問題，完善實驗設計,使其對即將開始的科研活動更有信心。
3.3指導方式
高職學生第一次進行設計性的實踐活動,由于理論知識不夠扎實，且缺乏實踐經驗與技巧，在好奇與興奮的同時常會遇到各種各樣無法預料的問題和困難，挫折感也隨之而來。對此，首先應加強指導的頻度，切不可“放羊式”帶教。筆者的課題組每天第一件事就是由每位學生匯報前一天的實驗情況，包括檢查實驗記錄、實驗結果的分析、發(fā)現(xiàn)實驗存在的問題并提出解決方案、安排當天的研究工作內容等。筆者堅持每天現(xiàn)場指導1~2次，晚上及周末則通過電話或QQ的方式與學生聯(lián)系與溝通，適時解決學生遇到的難題，這樣既保證了研究工作的效率，又使學生在與帶教教師高頻率的接觸中不斷學習科研思維與技巧，從而提高了科研專題實習的帶教質量。其次，要注重開展階段性的小結匯報，不可“埋頭苦干式”帶教。筆者將課題組學生分為若干研究小組，要求每間隔兩個月左右，各研究小組的學生均應對前一階段的科研工作進行小結匯報。通過PPT形式進行口頭匯報、互相提問、教師點評，同時展示Word文檔形式的研究內容小結，師生共同從文字、標點符號、圖表、文本排版等方面找出不足。這樣既能促進學生及時回顧研究內容和理清研究思路、把握科研進度，同時也增加了師生、生生之間相互交流的機會，互相了解不同課題的研究情況，還能鍛煉學生的邏輯思維、語言表述、概括總結能力。最后，應盡可能增加科研訓練的途徑，如帶領學生深入生產一線，使其進一步融入生產企業(yè)氛圍；利用到外單位進行委托測試或合作研究的機會，將學生派往其他科研機構，使其進一步了解先進的設備，學習先進的技術。
3.4成果匯報
為評價學生進入科研專題實習階段以來的學習成效，在實習結束時，要求每位學生在帶教教師的指導下撰寫出完整的科研論文，并由各教研室進行考核與評價?？己藘?yōu)秀的學生參加系部論文答辯，要求學生在10分鐘內就課題研究的目的、內容、方法與結果等方面進行闡述。由校內外同行專家組成的答辯委員會對學生的課題意義、研究結果、論文寫作、幻燈片制作、表述能力、回答問題的思維等進行綜合評判，并按照考核評分標準給出學生相應的評分和評語。
4結語
為進一步加強我校教科研工作的管理，使教科研工作逐步邁向制度化、規(guī)范化、科學化的軌道，形成良好的教科研氛圍，培養(yǎng)教師教科研意識，激勵教師參與科研的興趣與熱情，不斷提高教師的專業(yè)素養(yǎng)，達到“科研興教、科研興?！钡哪康模瑫r便于將教師參與教科研工作情況納入全面工作考核中，依據(jù)上級主管部門及學校有關管理制度制訂本細則。
一、考核對象：全校正式在崗教職工，
二、考核部門：考核工作由教導處、科研辦和教研組具體負責實施。
三、考核總分：考核積分加獎勵分。
四、考核內容及辦法：
(一)各項材料上交。(10分)
教師按要求及時上交研究材料(教學隨筆、業(yè)務學習筆記和各種培訓筆記心得)等計10分，每缺交一次扣1分，遲交一次0.5分。
(二)業(yè)務學習及培訓。(20分)
1.業(yè)務學習：加強自我研修，豐厚自我積淀。(10分)
(1)學專著：每期至少閱讀一本教育教學書籍(包括雜志)，摘抄學習筆記不少于3000字并撰寫400字以上的學習體會。完成學習筆記和學習體會各得4分、對學習不負責任按1.5、1、0.5扣分;閱讀多本教育書籍并完成學習筆記和學習體會者按2、1、0.5加分。
(2)學業(yè)務：堅持日常業(yè)務學習，摘錄理論知識或學科知識，每周不少于300字。完成筆記整潔并無相互抄襲，每次得3分否則不得分，每學期檢查2次共6分。
2.業(yè)務培訓：(10分)
(1)培訓的考核主要包括：遠程教育培訓、外出學習培訓和各種校本培訓等各級各類學習培訓活動。
(2)考核內容主要包括：
考勤(2分)：無故缺席一次扣1分，遲到、早退一次各扣0.5分，扣完為止。
培訓記錄(5分)：(包括理論摘記、內容摘要或心得體會等)按要求完成得5分，未完成或明顯與培訓內容、要求不符每項次扣1分。
培訓效果(3分)：包括有關測試(如遠程教育培訓、各種校本培訓等)、學習匯報和經驗介紹(如外出學習匯報)等，每項次測試不合格扣1分，每缺一次學習匯報扣1分，扣完為止。
(三)常規(guī)教研活動(40分)
教師應積極參加本組的常規(guī)教研活動，在活動中發(fā)表見解，展示自我，提高水平。并作好聽、評課記錄。各教研組根據(jù)常規(guī)教研出勤情況、教師聽、評課記錄和上公開課情況予以考核。
1、教研活動滿勤15分，無故缺席一次扣3分，遲到一次扣2分，請事假一次扣1分，病假一次扣0.5分，公假不扣分。
2、教師應積極認真地參與各教研組組織的聽課、評課、學習等活動，活動中積極發(fā)言，認真筆記。
(1)聽課(15分)：教師每期聽課不得低于15節(jié)，聽課筆記應該有批注，差聽一節(jié)扣1分，無批注每節(jié)扣0.3分。
(2)教師評課(5分)：評課時教師應積極發(fā)言，教研組有發(fā)言記錄。每差一次扣0.3分。
