緒論：在尋找寫作靈感嗎？愛(ài)發(fā)表網(wǎng)為您精選了8篇人大副主任述職報(bào)告，愿這些內(nèi)容能夠啟迪您的思維，激發(fā)您的創(chuàng)作熱情，歡迎您的閱讀與分享！

篇1

作為車間副主任，在分管領(lǐng)導(dǎo)及主任的領(lǐng)導(dǎo)下，在各部門的真誠(chéng)協(xié)作和大力支持下，始終堅(jiān)持“生產(chǎn)加工鐵手抓質(zhì)量、質(zhì)量管控鐵手抓過(guò)程、過(guò)程管理鐵手抓細(xì)節(jié)”的生產(chǎn)加工理念，以《打葉車間細(xì)節(jié)管理規(guī)則》(以下簡(jiǎn)稱“規(guī)則”)為平臺(tái)，以繼續(xù)推行落實(shí)《規(guī)則》為手段，以全面提升車間整體生產(chǎn)加工及服務(wù)水平為目標(biāo)，本著“狠、嚴(yán)、細(xì)”的工作原則，在安全文明生產(chǎn)、產(chǎn)品質(zhì)量管控、員工教育與培訓(xùn)等方面，勵(lì)精圖治、全力拼搏、開(kāi)拓創(chuàng)新，順利完成了公司交給的各項(xiàng)工作任務(wù)，并取得了較好的成績(jī)。現(xiàn)將任車間副主任以來(lái)的工作情況述職如下，請(qǐng)予評(píng)議。

一、生產(chǎn)加工鐵手抓質(zhì)量，突出一個(gè)“狠”字

任車間副主任以來(lái)，在整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程中，始終牢記“質(zhì)量就是生命”的方針。嚴(yán)格執(zhí)行行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和《質(zhì)量管理體系》要求，一切工作都服從、服務(wù)于質(zhì)量，自始至終把質(zhì)量放在第一位。

一是狠狠抓住“質(zhì)量意識(shí)”這根弦。質(zhì)量意識(shí)的強(qiáng)弱，直接影響到“質(zhì)量責(zé)任”與“規(guī)范意識(shí)”。近二年在車間主任領(lǐng)導(dǎo)下，在操作工的“質(zhì)量意識(shí)”教育與培養(yǎng)方面下了硬功夫，花了大力氣，效果十分明顯。

二是狠狠抓住“規(guī)范操作”這根繩。規(guī)范操作是保證生產(chǎn)加工質(zhì)量的技術(shù)基礎(chǔ)。根據(jù)操作技能與規(guī)范化要求，對(duì)員工進(jìn)行了多次自培自訓(xùn)。在生產(chǎn)過(guò)程中幫教，在幫教中提高;在實(shí)踐中探索，在探索中進(jìn)步。無(wú)論新老操作人員在操作技術(shù)與規(guī)范上均有了長(zhǎng)足進(jìn)步。

三是狠狠抓住工藝指標(biāo)這根筋。工藝指標(biāo)既是行業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)，也是客戶的要求。近二年特別是2008年，車間克服往年只看成品是否合格的陋習(xí)，把只看成品工藝指標(biāo)合格轉(zhuǎn)變?yōu)榇_保每道工序工藝指標(biāo)達(dá)標(biāo)，并且以一貫之，從不放松，真正保證了產(chǎn)品質(zhì)量的持續(xù)穩(wěn)定性。

二、質(zhì)量監(jiān)控鐵手抓過(guò)程，突出一個(gè)“嚴(yán)”字

產(chǎn)品質(zhì)量的優(yōu)劣主要在于過(guò)程管控嚴(yán)松度。在質(zhì)量管控中，高度重視每道工序的嚴(yán)格控制，真正從產(chǎn)品結(jié)果控制向過(guò)程控制轉(zhuǎn)變。

首先，嚴(yán)把各道工序質(zhì)量關(guān)。堅(jiān)決杜絕不合格產(chǎn)品流入下一道工序，使整個(gè)生產(chǎn)流程良性循環(huán)。

其次，嚴(yán)把雜物控制關(guān)。自始至終把雜物挑選工作作為質(zhì)量管控的重要環(huán)節(jié)，從鋪葉解把到復(fù)烤機(jī)尾,序序把關(guān)、層層把關(guān)、“嚴(yán)防死守”，確保一類雜物為零。

再次，嚴(yán)把產(chǎn)品水份關(guān)。加工中水份控制是產(chǎn)品質(zhì)量的重中之重。年度烤季從回潮、潤(rùn)葉、復(fù)烤等重要環(huán)節(jié)、對(duì)水份管控是費(fèi)了心思的，根據(jù)各中煙公司不同的個(gè)性化需求，進(jìn)行調(diào)整與控制，滿足了客戶的要求，如紅云集團(tuán)在加工過(guò)程中“臨界點(diǎn)潤(rùn)葉工藝”和“低溫烘烤工藝技術(shù)”給我們上了生動(dòng)的一課，受益非淺。對(duì)參數(shù)的調(diào)控與等級(jí)的對(duì)比起到了技術(shù)性的指導(dǎo)作用，真正能將加工水分把握得住，把握得準(zhǔn)。

三、過(guò)程管理鐵手抓環(huán)節(jié)，突出一個(gè)“細(xì)”字

近二年始終如一地把《規(guī)則》貫穿于各項(xiàng)工作的環(huán)節(jié)中去，堅(jiān)持以《規(guī)則》考核工作，用《規(guī)則》規(guī)范工作，把工作落實(shí)到細(xì)節(jié)里。堅(jiān)持以人為本，嚴(yán)格考評(píng)考核制度，使每項(xiàng)工作做到位、做到家;做好、做實(shí)、做細(xì)每件事。

第一、班與班、機(jī)臺(tái)與機(jī)臺(tái)之間交接記錄做得細(xì)。不留遺漏、不缺項(xiàng)目，真正做到了數(shù)據(jù)全、數(shù)字準(zhǔn)、項(xiàng)目齊。交班清楚，接班明白。

第二、當(dāng)班考評(píng)考核做得細(xì)。從勞動(dòng)紀(jì)律、規(guī)范操作、安全檢查、生產(chǎn)流程、到設(shè)備運(yùn)行狀況，均有考評(píng)考核結(jié)果。既有數(shù)字上的量化，又有文字上的記錄，為車間的全面管理提供了科學(xué)的第一手資料。

第三、安全工作抓得細(xì)。安全是生產(chǎn)的重點(diǎn)、要點(diǎn)，安全就是穩(wěn)定，安全就是效益，安全無(wú)小事。近二年始終把安全工作納入“績(jī)效考評(píng)考核”。實(shí)行“值班主任、段長(zhǎng)、機(jī)臺(tái)”三層考核，每班一考核為日考，每周一考核為周考，每月一評(píng)比為月考，將考核結(jié)果納入績(jī)效獎(jiǎng)罰。通過(guò)三層嚴(yán)考細(xì)評(píng)，車間安全生產(chǎn)工作無(wú)一例安全事故。

四、存在的不足與改進(jìn)措施

(一)存在的不足：

1、管理不到位。

2、因工作忙亂，有時(shí)不按程序辦事處事，留下安全隱患。

3、《規(guī)則》落實(shí)不徹底，時(shí)松時(shí)緊、時(shí)好時(shí)壞。

(二)改進(jìn)措施：

1、管理不到位是因?yàn)椤耙?guī)則”沒(méi)落實(shí)。因而在今后工作中要加大各項(xiàng)工作的落實(shí)力度、檢查力度、考評(píng)力度。

2、不按程序辦事處事，是因?yàn)閷?duì)操作技能與工作內(nèi)容不明了，因此在今后工作中要加大對(duì)員工“規(guī)范化”培訓(xùn)的力度與深度。

3、“規(guī)則”落實(shí)不切底，是因?yàn)閳?zhí)行力度不夠。在今后工作中要嚴(yán)格要求員工對(duì)定了的事就要執(zhí)行，執(zhí)行就要到位;凡事都必須要有“安排、落實(shí)、檢查、考核、評(píng)定”等程序，不可或缺。

五、下步工作基本思路：

在分管領(lǐng)導(dǎo)及主任的領(lǐng)導(dǎo)下，在吸取教訓(xùn)克服不足的基礎(chǔ)上，既要楊長(zhǎng)避短，又要主動(dòng)創(chuàng)新;主要在以下三個(gè)方面要有新的突破。

(一)、要在《規(guī)則》推行與落實(shí)上下苦功夫，練好內(nèi)功，養(yǎng)好習(xí)慣，真正將《細(xì)則》條款落實(shí)到工作中去，落實(shí)到細(xì)節(jié)中去。

(二)、要在現(xiàn)場(chǎng)管理上花大氣力，常抓不松、持之以恒，以切底改變車間的面貌。

篇2

秋去冬來(lái)，從衛(wèi)生局來(lái)到人大工作很快就近一年時(shí)間，在人大各位領(lǐng)導(dǎo)和同志們的關(guān)心支持下，應(yīng)該說(shuō)情況基本熟悉，工作基本適應(yīng)，任務(wù)基本完成。

在新的崗位上，分工聯(lián)系社會(huì)事業(yè)部門，更切身體會(huì)到科學(xué)發(fā)展、協(xié)調(diào)發(fā)展、統(tǒng)籌發(fā)展的重要性和必然性。一年來(lái)和工委同志們一起，圍繞相關(guān)議題，主要做了以下幾方面工作：

一是抓好關(guān)于職業(yè)病防治工作的主任會(huì)議議題調(diào)查工作。隨著我市工業(yè)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，我市可能產(chǎn)生職業(yè)病危害的企業(yè)和工種日益增多，在堅(jiān)持以人為本，著力構(gòu)建和諧社會(huì)的新形勢(shì)下，6月份主任會(huì)議專題聽(tīng)取了我市《職業(yè)病防治法》貫徹實(shí)施情況的匯報(bào)。為了做好議題的審議工作，6月上旬我們的同志分別到衛(wèi)生局、安監(jiān)局、疾控中心和車邏鎮(zhèn)走訪調(diào)查，聽(tīng)取相關(guān)匯報(bào)，并召開(kāi)由鄉(xiāng)企局、衛(wèi)生監(jiān)督所、相關(guān)重點(diǎn)企業(yè)等單位負(fù)責(zé)人參加的座談會(huì)，形成了全市《職業(yè)病防治法》貫徹實(shí)施情況的調(diào)查報(bào)告。我們認(rèn)為，針對(duì)我市職業(yè)病防治工作現(xiàn)狀，要強(qiáng)化宣傳教育培訓(xùn)，提高全社會(huì)職業(yè)病防治意識(shí)；加強(qiáng)協(xié)調(diào)配合，建立統(tǒng)一高效的監(jiān)管機(jī)制；狠抓基礎(chǔ)工作，有效預(yù)防和控制職業(yè)危害，不斷提高職業(yè)衛(wèi)生監(jiān)管水平。市政府十分重視，分管市長(zhǎng)明確表態(tài)，要加大執(zhí)法力度，重點(diǎn)抓好企業(yè)法人培訓(xùn)，提高職工自我保護(hù)意識(shí)，加強(qiáng)對(duì)重點(diǎn)企業(yè)的重點(diǎn)檢查。

二是圍繞食品衛(wèi)生安全“難點(diǎn)”問(wèn)題，搞好聯(lián)動(dòng)執(zhí)法檢查。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)乃至全球食品衛(wèi)生安全問(wèn)題不斷，“問(wèn)題食品”屢禁不止，廣大百姓苦不堪言，深受其害。今年__市人大常委會(huì)決定從8月份起在全市進(jìn)行一次食品衛(wèi)生市縣聯(lián)動(dòng)執(zhí)法檢查活動(dòng)，根據(jù)方案要求，我們高度重視、精心安排，深入走訪、調(diào)研?？偟目磥?lái)，我市食品安全形勢(shì)總體是好的，但也存在一些不容忽視的問(wèn)題，如食品衛(wèi)生管理制度落實(shí)還不到位，管理體制有待進(jìn)一步理順，群眾食品衛(wèi)生安全意識(shí)不強(qiáng)，特別是農(nóng)村食品安全，由于監(jiān)管力量薄弱，農(nóng)民自身防范意識(shí)差，令人擔(dān)憂。針對(duì)這些問(wèn)題，我們?cè)趫?bào)送的調(diào)查報(bào)告中，建議強(qiáng)化《食品衛(wèi)生法》宣傳，增強(qiáng)全民食品衛(wèi)生安全意識(shí)；實(shí)行市場(chǎng)準(zhǔn)入，推進(jìn)“食品放心工程”建設(shè)；抓好重點(diǎn)環(huán)節(jié)，提高食品衛(wèi)生監(jiān)督效能；加大領(lǐng)導(dǎo)力度，提升食品監(jiān)管水平。

三是組織好關(guān)于“緩解看病難、看病貴”問(wèn)題的視察活動(dòng)。根據(jù)主任會(huì)議安排，3月份我們主動(dòng)與衛(wèi)生局對(duì)接、認(rèn)真準(zhǔn)備，對(duì)匯報(bào)材料的準(zhǔn)備、視察單位等精心安排。3月31日市人大對(duì)市合管辦、疾控中心、人民醫(yī)院病房樓、開(kāi)發(fā)區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心和文游社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)站等進(jìn)行了實(shí)地視察，在聽(tīng)取了衛(wèi)生局關(guān)于緩解“看病難、看病貴”問(wèn)題的情況匯報(bào)后，認(rèn)真進(jìn)行了審議。針對(duì)實(shí)際情況和問(wèn)題，向市政府和職能部門提出了加強(qiáng)公共衛(wèi)生的宣傳，提高全民預(yù)防疾病的水平；切實(shí)關(guān)注民生，把緩解看病難、看病貴作為民生問(wèn)題的重要切入點(diǎn)；從構(gòu)建和諧社會(huì)的高度加強(qiáng)對(duì)困難群體大病統(tǒng)籌的扶持力度；逐步加大投入，加強(qiáng)公共衛(wèi)生服務(wù)設(shè)施的建設(shè)。

四是關(guān)注城市發(fā)展，努力推進(jìn)基礎(chǔ)設(shè)施建設(shè)。市政府為了進(jìn)一步推進(jìn)城市東擴(kuò)戰(zhàn)略，加快城市建設(shè)步伐，促進(jìn)__城市新區(qū)功能的進(jìn)一步完善，增強(qiáng)后發(fā)優(yōu)勢(shì)，采取bt模式對(duì)海潮東路、通湖東路延伸建設(shè)。我們與有關(guān)主管部門認(rèn)真研究，細(xì)致對(duì)接，建議市政府認(rèn)真測(cè)算，嚴(yán)守誠(chéng)信，確保政府對(duì)外形象；加強(qiáng)規(guī)劃，充分發(fā)揮該路的土地優(yōu)勢(shì)，使土地增值后減輕政府的資金投入壓力，同時(shí)還要堅(jiān)持標(biāo)準(zhǔn)，堅(jiān)持質(zhì)量，建好形象路。經(jīng)過(guò)政府的努力，目前該路已建成通車，得到了社會(huì)一致好評(píng)。與此同時(shí)，還對(duì)政府申請(qǐng)農(nóng)發(fā)行貸款建設(shè)甸湯等農(nóng)村骨干公路項(xiàng)目，也給予了大力的支持，促進(jìn)了該項(xiàng)目的有序推進(jìn)。

五是抓好常委會(huì)議題，推進(jìn)旅游業(yè)發(fā)展。為了切實(shí)做好市十三屆人大常委會(huì)第五次會(huì)議關(guān)于聽(tīng)取市政府關(guān)于旅游業(yè)發(fā)展情況的匯報(bào)準(zhǔn)備，我們擬定了調(diào)研方案，經(jīng)領(lǐng)導(dǎo)審定，常委會(huì)組成五個(gè)調(diào)查組，于8月至9月上旬分赴旅游局、文化局、宗教局、商貿(mào)總

公司和馬棚、界首、天山、菱塘、八橋、臨澤、龍虬等鄉(xiāng)鎮(zhèn)走訪調(diào)查，并赴儀征市、鹽城市鹽都區(qū)等周邊縣市學(xué)習(xí)考察。撰寫了綜合調(diào)查報(bào)告，在肯定成績(jī)的同時(shí)，指出了我市旅游業(yè)發(fā)展與旅游資源比較豐富還不相符，與先進(jìn)縣市相比，存在著明顯的差距和不足，圍繞“小、低、散、舊”的突出問(wèn)題，就繼續(xù)轉(zhuǎn)變觀念，增強(qiáng)旅游業(yè)發(fā)展動(dòng)力；堅(jiān)持規(guī)劃引領(lǐng)，加快整合全市旅游業(yè)資源；完善投入機(jī)制，著力打造旅游拳頭產(chǎn)品；精心組織實(shí)施，合力推進(jìn)旅游大市建設(shè)五個(gè)方面向市政府提出了發(fā)展旅游業(yè)的建議。市政府已采取多種措施，積極落實(shí)了市人大的審議意見(jiàn)。六是配合__人大聯(lián)動(dòng)執(zhí)法檢查，推進(jìn)《環(huán)境保護(hù)法》的貫徹。為了全面落實(shí)科學(xué)發(fā)展觀，加強(qiáng)環(huán)境保護(hù)工作，保障人民群眾的切身利益，根據(jù)__市人大的統(tǒng)一部署，從4月起開(kāi)展了環(huán)保聯(lián)動(dòng)執(zhí)法檢查活動(dòng)。常委會(huì)決定成立了執(zhí)法檢查組，于4月上旬動(dòng)員部署，具體制定了實(shí)施方案，明確任務(wù)，落實(shí)責(zé)任，確定檢點(diǎn)。4月中下旬市政府及各鄉(xiāng)鎮(zhèn)組織相關(guān)單位進(jìn)行自查。同時(shí)，市人大執(zhí)法檢查組分別赴天山、市污水處理廠、開(kāi)發(fā)區(qū)、湯莊、八橋、車邏、__鎮(zhèn)進(jìn)行執(zhí)法檢查。5月上旬，在聽(tīng)取政府和相關(guān)單位匯報(bào)、廣泛調(diào)研及檢查的基礎(chǔ)上，進(jìn)行總結(jié)并形成書(shū)面報(bào)告，報(bào)送__市人大常委會(huì)執(zhí)法檢查組，6月至9月，針對(duì)執(zhí)法檢查中發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題，按照__市人大常委會(huì)的部署和要求，督促政府及職能部門認(rèn)真整改，狠抓落實(shí)。

七是認(rèn)真辦理領(lǐng)導(dǎo)交辦事項(xiàng)，推進(jìn)城市綠化、城市管理和鹽河小島地塊的實(shí)施規(guī)劃的調(diào)整。5月上旬按照主任會(huì)議安排，我們就近年來(lái)我市城市管理和城市綠化工作，進(jìn)行一次專題調(diào)研，分別聽(tīng)取建設(shè)局和城管局的工作情況匯報(bào)，召開(kāi)城建、城管下屬部門負(fù)責(zé)人座談會(huì)和社區(qū)主任、市民代表、市人大代表、開(kāi)發(fā)區(qū)、__鎮(zhèn)分管負(fù)責(zé)人參加的座談會(huì)，實(shí)地察看城區(qū)道路、綠化現(xiàn)場(chǎng)，還走訪了部分市民。撰寫了專題調(diào)研報(bào)告，重點(diǎn)提出了城市管理八個(gè)方面薄弱環(huán)節(jié)和城市綠化方面的四個(gè)問(wèn)題，建議重視加快城市基礎(chǔ)設(shè)施建設(shè)步伐，完善城市功能；加強(qiáng)城管隊(duì)伍作風(fēng)建設(shè)，強(qiáng)化城市管理綜合治理；同時(shí)，加強(qiáng)規(guī)劃，配套完善各類綠地；依法規(guī)范管理，抓好綠化隊(duì)伍建設(shè)；加大投入，提升城市綠化水平。對(duì)此，兩個(gè)職能部門高度重視，積極整改，尤其是建設(shè)局行動(dòng)迅速，制定了“管、補(bǔ)、創(chuàng)”整改措施，按序時(shí)分解了城市綠化整治及維護(hù)補(bǔ)植任務(wù)。5月中下旬，我們就陸宇公司鹽河小島地塊的實(shí)施進(jìn)展情況進(jìn)行調(diào)查，分別走訪建設(shè)局、國(guó)土局，并實(shí)地查閱資料、察看現(xiàn)場(chǎng)，形成客觀、真實(shí)的調(diào)查報(bào)告，認(rèn)真負(fù)責(zé)地根據(jù)調(diào)查情況，結(jié)合鹽河風(fēng)光帶建設(shè)規(guī)劃的總體要求和專家意見(jiàn)，從三個(gè)方面對(duì)鹽河風(fēng)光帶的開(kāi)發(fā)規(guī)劃提出了建議，供領(lǐng)導(dǎo)決策參考。

一年來(lái)的工作在緊張和壓力中基本順利，在工作中我能夠虛心向老同志學(xué)習(xí)，遇事多請(qǐng)教、多溝通、多交流，重大或重要問(wèn)題多請(qǐng)示、多會(huì)商，廣泛征求意見(jiàn)，力求建議或意見(jiàn)的提出，都能符合__的實(shí)際切實(shí)可行，都能有助于__又快又好的發(fā)展。

在工作之中、之余，不放松理論學(xué)習(xí)和業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)，一年中先后三次參加__黨校理論學(xué)習(xí)班、省社會(huì)主義學(xué)院無(wú)黨派人士培訓(xùn)班和省委組織部、統(tǒng)戰(zhàn)部舉辦的為期兩個(gè)月的第十二期縣處級(jí)黨外干部主題教育培訓(xùn)班。三次學(xué)習(xí)豐富了自己的頭腦，對(duì)中國(guó)特色社會(huì)主義建設(shè)的理論，我國(guó)的政黨制度、統(tǒng)一戰(zhàn)線思想、科學(xué)發(fā)展觀、改革開(kāi)放三十年的成果與實(shí)踐等，有了更深、更新、更全面的理解。同時(shí)利用業(yè)余時(shí)間，順利完成了歷時(shí)三年的__大學(xué)管理學(xué)院公共管理專業(yè)行政管理方向在職研究生的學(xué)習(xí)，撰寫的論文《新農(nóng)村建設(shè)框架下農(nóng)村衛(wèi)生事業(yè)投入的實(shí)證分析：以江蘇為例》，一次全票通過(guò)論文答辯，同意授予公共管理學(xué)碩士學(xué)位（mpa），論文被答辯專家預(yù)評(píng)為優(yōu)秀論文得到推薦。

在平時(shí)的工作中，嚴(yán)格執(zhí)行領(lǐng)導(dǎo)干部廉潔從政的各項(xiàng)規(guī)定，從不利用手中的權(quán)力謀取私利。

篇3

【關(guān)鍵詞】 川芎嗪注射液; 腹膜間皮細(xì)胞; 高糖; ⅰ型膠原; 基質(zhì)金屬蛋白酶?1; 基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑?1; 體外實(shí)驗(yàn)

zhu gs, he js. j chin integr med. 2009; 7(1): 65?69.

received june 18, 2008; accepted july 22, 2008; published online january 15, 2009.

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doi: 10.3736/jcim20090110open access

effects of ligustrazine injection on high glucose?induced type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase?1 and tissue inhibitor of metalloproteinase?1 expressions in human peritoneal mesothelial cells in vitro

gui?song zhu, jin?song he

department of nephrology, the affiliated drum tower hospital, nanjing university medical school, nanjing, jiangsu province 210008, china

objective: to investigate the effects of ligustrazine injection on type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase?1 (mmp?1) and tissue inhibitor of metalloproteinase?1 (timp?1) expressions in human peritoneal mesothelial cells (hpmcs) cultured in high glucose conditions.

methods: hpmcs were isolated from human omenta by trypsin digestion method and subcultured. then, the hpmcs were divided into normal control group, high glucose group and high glucose plus low?, medium? and high?dose ligustrazine (10, 20 and 40 mg/l ligustrazine respectively) groups. semi?quantitative reverse transcription?polymerase chain reaction was used to detect the expressions of type ⅰ collagen, mmp?1 and timp?1 mrnas in hpmcs. proteins of type ⅰ collagen, mmp?1 and timp?1 in culture supernatants were measured by enzyme?linked immunosorbent assay (elisa). cell protein concentration was measured by trace bicinchoninic acid method to correct the elisa assay results.

results: ligustrazine injection could significantly decrease high glucose?induced type ⅰ collagen and timp?1 expressions in a dose?dependent manner both in protein and gene levels (p<0.05, p<0.01). in addition, medium? and high?dose ligustrazine injection could significantly increase mmp?1 expression which was inhibited by high glucose concentrations (p<0.05).

conclusion: ligustrazine injection does not only decrease type ⅰ collagen synthesis, but also promote its degradation by modulating unbalanced mmp?1/timp?1 expression in hpmcs cultured in high glucose conditions.

keywords: ligustrazine injection; human peritoneal mesothelial cells; high glucose; type ⅰ collagen; matrix metalloproteinase?1; tissue inhibitor of metalloproteinase?1; in vitro

腹膜纖維化是腹膜透析治療的主要并發(fā)癥，最終導(dǎo)致腹膜功能衰竭，這是腹膜透析患者退出治療的主要原因［1］。腹膜纖維化以細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix, ecm）的過(guò)度沉積為特點(diǎn)［2］。研究表明，ecm的過(guò)度沉積是由于ecm合成與降解失衡而引起［3］。ⅰ型膠原是腹膜纖維化中主要的ecm［4］，其降解過(guò)程受基質(zhì)金屬蛋白酶?1（matrix metalloproteinase?1, mmp?1）及其特異性抑制劑金屬蛋白酶組織抑制劑?1（tissue inhibitor of metalloproteinase?1, timp?1）調(diào)控［5］。有研究證實(shí)，高糖能上調(diào)腹膜間皮細(xì)胞（human peritoneal mesothelial cells, hpmcs）ⅰ型膠原和timp?1的表達(dá)，降低mmp?1活性［3］。本研究通過(guò)觀察川芎嗪注射液對(duì)高糖刺激下hpmcs ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1表達(dá)的影響，探討川芎嗪在防治腹膜纖維化中的作用及其機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 試劑和主要儀器 川芎嗪注射液（江蘇蘇中藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，批準(zhǔn)號(hào)為國(guó)藥準(zhǔn)字h20020630）；50％葡萄糖注射液（江蘇方強(qiáng)制藥廠，批號(hào)為200710111）。磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered solution, pbs）、胎牛血清（fetal calf serum, fcs）、trizol和rpmi?1640粉劑等（gibco公司）；胰蛋白酶和瓊脂糖粉等（promega公司）；ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme?linked immunosorbent assay, elisa）試劑盒（adl公司）；二喹啉甲酸（bicinchoninic acid, bca）蛋白含量檢測(cè)試劑盒（南京凱基生物科技公司）；ⅰ型膠原、mmp?1、timp?1和β?actin引物，m?mlv第一鏈cdna合成試劑盒和taq酶等（invitrogen公司）；抗細(xì)胞角蛋白抗體、抗細(xì)胞波形蛋白抗體、第ⅷ因子抗體和抗白細(xì)胞cd45抗體（北京中山生物技術(shù)有限公司）。nu?2500e二氧化碳培養(yǎng)箱（nuaire公司）；全自動(dòng)酶標(biāo)儀（biobank公司）；生物電泳圖像分析系統(tǒng)（上海復(fù)日科技有限公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 hpmcs的培養(yǎng)與鑒定 取來(lái)自南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院普外科擇期腹部手術(shù)患者（排除尿毒癥、腹膜炎）捐獻(xiàn)的大網(wǎng)膜組織，按文獻(xiàn)［3］方法原代培養(yǎng)hpmcs，按1?3傳代，第3代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)，每次實(shí)驗(yàn)均由來(lái)自3個(gè)患者的標(biāo)本進(jìn)行3次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)。倒置相差顯微鏡觀察hpmcs呈多邊形，似鋪路鵝卵石樣外觀；免疫組化鑒定抗細(xì)胞角蛋白抗體和抗波形蛋白抗體染色陽(yáng)性，抗第ⅷ因子抗體和抗白細(xì)胞cd45抗體染色陰性。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)步驟和分組 hpmcs用含1％fcs的rpmi?1640培養(yǎng)液同步培養(yǎng)24 h后分為5組（每組設(shè)3個(gè)樣本）：正常組（完全培養(yǎng)液）、高糖對(duì)照組（2.5％葡萄糖）和高糖（2.5％葡萄糖）加低、中、高劑量川芎嗪（10、20和40 mg/l）組。各組完全培養(yǎng)液均為含有15％ fcs的rpmi?1640培養(yǎng)液。細(xì)胞置于37 ℃、5％ co2培養(yǎng)箱培養(yǎng)48 h。

1.2.3 elisa法檢測(cè)細(xì)胞上清液中ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1含量 分組干預(yù)48 h后，離心收集上清液，按elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)檢測(cè)ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1表達(dá)水平。用0.1 mol/l naoh溶解細(xì)胞沉淀，bca蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定細(xì)胞沉淀中蛋白質(zhì)濃度，用相應(yīng)蛋白質(zhì)濃度結(jié)果校正檢測(cè)結(jié)果。

1.2.4 半定量rt?pcr 分組處理同上。采用trizol一步法提取總rna，2 μg總rna進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成cdna，50 μl反應(yīng)體系進(jìn)行pcr擴(kuò)增，以β?actin作內(nèi)參照（引物序列及反應(yīng)條件見(jiàn)表1）。1.5％瓊脂糖凝膠電泳（110 v，15 min）進(jìn)行pcr產(chǎn)物鑒定，電泳圖像分析儀掃描分析，mrna相對(duì)含量用其pcr產(chǎn)物吸光值（absorance, a）與β?actin a值的比值表示。引物及pcr反應(yīng)條件見(jiàn)表1。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用x±s表示，采用spss 15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間差異比較采用單因素方差分析，兩組間均數(shù)比較采用lsd?t檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。 表1 ⅰ型膠原、mmp?1、timp?1和β?actin引物序列及pcr反應(yīng)條件

2 結(jié) 果

2.1 上清液中ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1蛋白質(zhì)水平 與正常組比較，高糖對(duì)照組上清液中ⅰ型膠原和timp?1含量顯著升高（p<0.01），mmp?1含量顯著下降（p<0.01）；與高糖對(duì)照組比較，低、中和高劑量川芎嗪組上清液中的ⅰ型膠原和timp?1含量顯著降低（p<0.05, p<0.01），且兩者均呈量效關(guān)系，中、高劑量川芎嗪組上清液mmp?1含量顯著增加（p<0.01）。見(jiàn)表2。表2 各組上清液中ⅰ型膠原、mmp?1和timp?1蛋白質(zhì)表達(dá)

2.2 hpmcsⅰ型膠原、mmp?1和timp?1 mrna的表達(dá) 與正常組比較，高糖對(duì)照組hpmcs ⅰ型膠原/β?actin mrna和timp?1/β?actin mrna分別上升（15.43±0.83）倍和（4.19±0.09）倍（p<0.01），mmp?1/β?actin mrna下降（86.9±0.44）%（p<0.01）；與高糖對(duì)照組相比，低、中、高劑量川芎嗪組ⅰ型膠原/β?actin mrna和timp?1/β?actin mrna表達(dá)水平均顯著下調(diào)（p<0.05），兩者均呈量效關(guān)系，中、高劑量川芎嗪組mmp?1/β?actin mrna表達(dá)顯著增加（p<0.05）。見(jiàn)圖1和圖2。

3 討 論

高糖透析液導(dǎo)致ecm過(guò)度沉積是腹膜纖維化的病理基礎(chǔ)［2］，研究表明，高糖不僅增加hpmcsⅰ型膠原的表達(dá)，并且引起ⅰ型膠原降解酶系mmp?1/timp?1的表達(dá)失衡［3］。我們的研究結(jié)果與之基本相同，此外我們發(fā)現(xiàn)，川芎嗪能顯著對(duì)抗高糖的上述作用。

在生理?xiàng)l件下，hpmcs可以產(chǎn)生一定量的ecm和mmps/timps［3, 6］。mmps是降解ecm的蛋白水解酶系，幾乎能降解全部ecm成分。timps是內(nèi)源性分泌蛋白，作為mmps的特異性抑制因子，其n'端可與相應(yīng)的mmps催化活性中心的鋅離子結(jié)合而抑制其催化活性［7］。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究川芎嗪對(duì)hpmcs在高糖刺激下主要ecm ⅰ型膠原及其降解酶系mmp?1/timp?1分泌及表達(dá)的影響，旨在探討川芎嗪對(duì)hpmcs在高糖環(huán)境下ⅰ型膠原的合成和降解的干預(yù)作用及其機(jī)制。結(jié)果顯示，川芎嗪能顯著降低高糖所致的ⅰ型膠原的過(guò)度合成，同時(shí)顯著下調(diào)timp?1的表達(dá)，增加mmp?1的表達(dá)，提示川芎嗪亦能通過(guò)調(diào)節(jié)mmp?1/timp?1的平衡，從而促進(jìn)ⅰ型膠原的降解，減少ecm沉積。由此我們推測(cè)，川芎嗪可能具有預(yù)防或延緩腹膜纖維化的作用。

川芎嗪是中藥川芎的有效成分之一，屬酰胺類生物堿，具有活血化瘀的功效。藥理實(shí)驗(yàn)證明，川芎嗪具有擴(kuò)張血管、改善微循環(huán)、調(diào)節(jié)免疫和鈣離子拮抗的作用［8］。目前川芎嗪抑制ⅰ型膠原、timp?1和增加mmp?1表達(dá)的機(jī)制尚不清楚。以往的研究發(fā)現(xiàn)這可能與抑制轉(zhuǎn)化細(xì)胞生長(zhǎng)因子β1（transforming growth factor?β1, tgf?β1）表達(dá)有關(guān)［9, 10］。tgf?β1是重要的致纖維化細(xì)胞因子，參與了腹膜纖維化的病理過(guò)程［2］。tgf?β1可增加ⅰ型膠原的合成，并且抑制mmps的活性而激活timps，使ⅰ型膠原降解減少［3, 11］。有研究報(bào)道，川芎嗪能降低多種細(xì)胞如心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的膠原合成和timp?1表達(dá)，而增加mmp?1的分泌和表達(dá)，進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)這可能是通過(guò)抑制tgf?β/smads信號(hào)傳導(dǎo)通路繼而抑制tgf?β1表達(dá)的結(jié)果［9, 10, 12］。我們前期研究證實(shí)，川芎嗪能下調(diào)高糖致hpmcs tgf?β1的表達(dá)（文章待發(fā)表）。因此我們推測(cè)，川芎嗪抑制tgf?β1的表達(dá)可能是其抑制hpmcs ⅰ型膠原合成和調(diào)整mmp?1/timp?1表達(dá)平衡的機(jī)制之一，其具體機(jī)制將是我們下一步要研究的內(nèi)容。

綜上所述，川芎嗪能抑制高糖致hpmcs ⅰ型膠原的過(guò)度合成，并且通過(guò)調(diào)節(jié)mmp?1/timp?1的平衡，促進(jìn)ⅰ型膠原降解，從而減少ecm的沉積，防止腹膜纖維化的發(fā)生和發(fā)展。因此，川芎嗪可能具有預(yù)防或延緩腹膜纖維化的作用，這對(duì)腹膜纖維化的機(jī)制及其防治的研究有一定借鑒和應(yīng)用價(jià)值。

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