時間：2023-08-14 09:25:19
緒論：在尋找寫作靈感嗎？愛發(fā)表網(wǎng)為您精選了8篇干部培養(yǎng)體系，愿這些內(nèi)容能夠啟迪您的思維，激發(fā)您的創(chuàng)作熱情，歡迎您的閱讀與分享！
關(guān)鍵詞：廣西科技干部培養(yǎng)；問題；對策引言： 21世紀(jì)的中國能不能實現(xiàn)科教興國，實現(xiàn)經(jīng)濟(jì)的騰飛，關(guān)鍵在于能不能有一支高素質(zhì)的科技干部隊伍。同樣的，廣西要摘掉貧困落后的帽子，同樣要依靠高素質(zhì)科技干部隊伍的正確領(lǐng)導(dǎo)。而現(xiàn)今北部灣經(jīng)濟(jì)區(qū)發(fā)展規(guī)劃上升為了國家發(fā)展戰(zhàn)略，既是給廣西帶來了前所未有的機(jī)遇，同時也伴隨著未知的巨大風(fēng)險。廣西能否抓住這大好機(jī)會，向著發(fā)達(dá)省份邁進(jìn)，科技干部起著決定性的作用。因此，廣西必須加大對科技干部隊伍的培養(yǎng)力度，以培育出更多優(yōu)秀的科技干部，為廣西的繁榮昌盛貢獻(xiàn)智謀與力量。
一、廣西科技干部培養(yǎng)的現(xiàn)狀。
廣西目前由政府人事部門選拔管理的專家有三種稱號：國家有突出貢獻(xiàn)中青年科學(xué)、技術(shù)、管理專家，享受政府特殊津貼專家和自治區(qū)有突出貢獻(xiàn)科技人員。截止2010年末，全自治區(qū)共有專業(yè)技術(shù)人員180余萬人，其中具有高級專業(yè)技術(shù)職稱8.05萬人，中級專業(yè)技術(shù)職稱65.85萬人，初級專業(yè)技術(shù)職稱100余萬人。有“國貢”專家100余人，“特貼”專家2000余人，“區(qū)貢”人員800余人；另外，由自治區(qū)黨委組織部選拔管理的“自治區(qū)優(yōu)秀專家”700余人。其中1996年～2010年“國貢”專家100余人，“特貼”專家300余人，“區(qū)貢”人員300余人，自治區(qū)優(yōu)秀專家200余人。全自治區(qū)的博士生導(dǎo)師由1996年的18名增加到2010年的200余人，博士由1996年的230名增加到2010年的2000余名（含在讀），高層次專家隊伍正在不斷成長壯大。2000年，自治區(qū)交通廳總工程師鄭皆連被選為中國工程院院士，廣西實現(xiàn)了兩院院士“零”的突破。
雖然廣西在科技干部培養(yǎng)方面已初見成效，隊伍正不斷擴(kuò)大，但面對巨大的科技人才缺口，科技干部無論在數(shù)量還是在質(zhì)量上都仍存在著明顯的不足，下面就廣西科技干部培養(yǎng)存在的問題進(jìn)行討論。
二、廣西科技干部培養(yǎng)存在的問題
（一）人才總量匱乏
目前，自治區(qū)專業(yè)技術(shù)人員不到全區(qū)人口的1/20，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于全國平均水平，對于滿足日益增長的科技干部需求，無疑是杯水車薪。
（二）科技干部隊伍整體素質(zhì)不高
目前，自治區(qū)專業(yè)技術(shù)人才仍以初級的為主，高級專業(yè)技術(shù)人員數(shù)量僅占整個專業(yè)技術(shù)人員隊伍的4.4%，高層次的科技人才嚴(yán)重缺乏，而且整個科技干部隊伍穩(wěn)定性比較差，人才流失嚴(yán)重，知識老化，專業(yè)面狹窄，科技骨干數(shù)量少，力量弱的矛盾突出。
（三）考核上重“量”不重“質(zhì)”
當(dāng)前，科技干部考核中強(qiáng)調(diào)“量”比較多，考慮“質(zhì)”比較少，有的單位把業(yè)績等同于學(xué)術(shù)論文和科研成果的數(shù)量，造成少數(shù)科技干部重論文數(shù)量、輕實際工作，重課題成果、輕試驗效益，重學(xué)歷提升、輕能力轉(zhuǎn)化。這樣使得科技干部的考核嚴(yán)重脫離了實際，不僅實現(xiàn)不了考核的根本目標(biāo)，還帶壞了行業(yè)的風(fēng)氣，嚴(yán)重拉低科級干部隊伍的整體水平。
（四）其他問題
有的單位培養(yǎng)計劃性不強(qiáng)，盲目追求大規(guī)模、高學(xué)歷，缺乏規(guī)劃，花了大量時間和精力卻達(dá)不到預(yù)期的效果；有的針對性不強(qiáng)、培養(yǎng)對象選拔把關(guān)不嚴(yán)、存在遷就照顧現(xiàn)象，而真正有能力的人才卻得不到任用，挫傷工作積極性；有的單位則培訓(xùn)的實效性不強(qiáng)，培養(yǎng)與使用分離、學(xué)歷與能力脫節(jié)與使用分離、學(xué)歷與能力脫節(jié)……
三、針對廣西科技干部培養(yǎng)存在問題的對策
（一）加大科技干部培養(yǎng)力度
針對目前我區(qū)科技干部數(shù)量匱乏，可以通過以下手段進(jìn)行改善：
1、面向本地區(qū)的科技人才，加大提拔力度，對真正有能力的人才適當(dāng)破格提拔；提出優(yōu)惠條件，例如：升職、加薪、出國考察學(xué)習(xí)等，吸引更多的人才加入到我區(qū)科技干部隊伍中。
2、面向區(qū)外優(yōu)秀的科技人才，以較為優(yōu)厚的條件，吸收引進(jìn)和招募，壯大我區(qū)科技干部隊伍。
3、針對有能力的人才，進(jìn)行干部上崗前培訓(xùn)，務(wù)求能達(dá)到崗位的實際需求。
（二）按照實際需求，有針對性的設(shè)置培養(yǎng)
根據(jù)自治區(qū)的實際需要和不同情況，根據(jù)層次的不同、類別的差異、多種渠道、多種形式地開展針對科技干部的培訓(xùn)。培訓(xùn)過程要時刻緊密結(jié)合我區(qū)經(jīng)濟(jì)、社會發(fā)展的實際需求，做到理論聯(lián)系實際；培訓(xùn)的內(nèi)容以科技、經(jīng)濟(jì)發(fā)展戰(zhàn)略和先進(jìn)的科技管理知識等為重點(diǎn)，也要貼近基層科技管理實際；培訓(xùn)的方法可以通過多手段教學(xué)，實現(xiàn)多媒體與書本、課堂教學(xué)與課外教學(xué)相結(jié)合，提高學(xué)員的參與性與積極性，并適當(dāng)?shù)陌才派鐣嵺`，提高學(xué)員解決實際問題的能力；培訓(xùn)的目的是擴(kuò)充我區(qū)科技干部隊伍、夠解決現(xiàn)今我區(qū)存在的實際問題，引領(lǐng)我區(qū)科技進(jìn)步的腳步、有能力應(yīng)對隨時出現(xiàn)的變化等。
（三）完善科技干部培養(yǎng)的考核標(biāo)準(zhǔn)
考核標(biāo)準(zhǔn)是衡量科技干部德才表現(xiàn)的重要尺度。必須構(gòu)建以業(yè)績?yōu)橹?，由品德、知識、能力等要素構(gòu)成的考核體系，著重考察科技干部的創(chuàng)新思想、創(chuàng)新能力、創(chuàng)新成果和解決實際問題的能力，既看論文成果的數(shù)量，更看含“金”量和含“新”量；既看學(xué)歷層次，又看實際工作能力；既看勞動強(qiáng)度，又看工作質(zhì)量，不斷增強(qiáng)考評內(nèi)容的全面性。在面對我區(qū)科技干部培養(yǎng)存在的問題時，必須立足現(xiàn)有條件，樹立有所為、有所不為的思想，在投向上重點(diǎn)向高層次人才傾斜，充分發(fā)揮高層次人才的領(lǐng)軍作用，努力形成重點(diǎn)推進(jìn)、協(xié)調(diào)發(fā)展、整體提高的局面。這樣才能體現(xiàn)科級干部培養(yǎng)的真正目的——引領(lǐng)我區(qū)科學(xué)技術(shù)水平實現(xiàn)質(zhì)的提升。
參考文獻(xiàn)：
實施“千名后備干部培養(yǎng)工程”是路局、路局黨委貫徹落實全路工作會議精神的重要舉措，目的是為全局各系統(tǒng)培養(yǎng)和儲備后備干部隊伍。我很榮幸成為路局“千名后備干部”中的一員，現(xiàn)已入吉林大學(xué)培訓(xùn)一個月之余，下面將自己在思想認(rèn)識、學(xué)習(xí)生活情況簡要匯報如下：
一、提高了我的思想認(rèn)識
懷著一顆感恩的心對待這次培訓(xùn)，我從內(nèi)心感激路局給我們創(chuàng)造這么好的學(xué)習(xí)機(jī)會，懷著一顆感恩的心好好學(xué)習(xí)，不辜負(fù)路局領(lǐng)導(dǎo)對我們的期望。珍惜這次難得的培訓(xùn)機(jī)遇，經(jīng)過近一個月來在吉大的學(xué)習(xí)，我深深感到，吉大做為全國重點(diǎn)大學(xué)有著雄厚的師資力量和一流的辦學(xué)經(jīng)驗，老師們精彩的授課，使我感到受益匪淺的同時，也看到了自身學(xué)識上的差距，因此，我一定要珍惜這次學(xué)習(xí)機(jī)會，充實自。我看到自身的壓力和責(zé)任，局長和黨委書記親自為我們做開班報告，使我看到路局對我們寄予的厚望，而我在上學(xué)受培的同時，還有很多同志在負(fù)擔(dān)著我的工作和責(zé)任，所以我沒有理由也沒有權(quán)利不好好學(xué)習(xí)。
二、認(rèn)真完成了階段性學(xué)習(xí)任務(wù)
路局、路局黨委以及段在安全生產(chǎn)壓力這么繁重的條件下、在這生產(chǎn)大忙時節(jié)，花這么大的精力、財力和時間組織這么大規(guī)模的培訓(xùn)，對于我個人的成長都是不可多得的機(jī)遇，這一切使我深受感動和鼓舞，因此我十分珍惜這難得的學(xué)習(xí)機(jī)會，因此我非常珍惜每一堂課、每一分鐘，都能認(rèn)真聽講、做好筆記。課后能做到及時復(fù)習(xí)和預(yù)習(xí)，按要求完成每學(xué)科作業(yè)，并撰寫心得體會，較好地完成了學(xué)習(xí)任務(wù)。
三、嚴(yán)格遵守學(xué)習(xí)紀(jì)律，積極參與班委組織的各項活動
從入校那天起，我就認(rèn)真學(xué)習(xí)了學(xué)員管理手冊，時刻牢記自己的職責(zé)和任務(wù)，時刻嚴(yán)格要求自己，絕不違反學(xué)員手冊以及吉大的規(guī)定。一個多月以來，盡管學(xué)習(xí)任務(wù)十分繁重，時間安排十分緊湊，但是我沒有出現(xiàn)一次遲到早退現(xiàn)象。課上認(rèn)真注意聽講不走動、不盹睡，不做與課堂無關(guān)的事，課下認(rèn)真遵守作息時間和宿舍就寢制度，不打牌、不飲酒，時刻牢記自己的單位領(lǐng)導(dǎo)的囑托，不給路局、段領(lǐng)導(dǎo)添亂、抹黑。服從指揮、聽從領(lǐng)導(dǎo)，對班委組織開展的各項活動我都能積極參與，參加籃球比賽、拔河比賽等活動，在自己身體得到鍛煉的同時還為班級貢獻(xiàn)一份力量。
學(xué)習(xí)是一個永無止境的過程。時代在前進(jìn)，社會在發(fā)展，新情況新問題層出不窮，新知識新技術(shù)不斷涌現(xiàn)。唯有勤奮學(xué)習(xí)、不斷學(xué)習(xí)，使學(xué)習(xí)成為常態(tài)，才能跟上時代步伐，做好各項工作。
學(xué)習(xí)貴用心。學(xué)而不思則罔。只埋頭讀書而不進(jìn)行思考，就會產(chǎn)生迷惘，最終徒勞無益。學(xué)習(xí)應(yīng)當(dāng)堅持學(xué)思結(jié)合，做到靜心、專心、用心和精心。靜心，就是排除干擾、抵擋誘惑，能夠沉住氣、坐得??；專心，就是聚精會神、全神貫注，能夠?qū)W得進(jìn)、有所得；用心，就是舍得下力氣、花功夫，不能心不在焉、敷衍了事；精心，就是深入細(xì)致、精益求精，防止淺嘗輒止、半途而廢。
學(xué)習(xí)貴得法。學(xué)習(xí)是一種復(fù)雜的腦力勞動，須講究方法。雖然學(xué)習(xí)方法因人而異，但也有規(guī)律可循。比如，應(yīng)重記憶、多反復(fù)。任何人要學(xué)習(xí)知識、獲得本領(lǐng)，都不能單純依靠電腦儲存和抄錄記載，而必須通過大腦記憶，把書本上的東西轉(zhuǎn)化為自己的認(rèn)識。重記憶，就要多反復(fù)。再如，應(yīng)重交流、多研討。通過溝通交流和研討磋商，可以相互啟發(fā)、取長補(bǔ)短，達(dá)到知識共享、同步提高的目的。又如，應(yīng)重運(yùn)用、多實踐。學(xué)習(xí)的目的是為了應(yīng)用。堅持邊學(xué)邊用、學(xué)用結(jié)合、以用促學(xué)，把滿足現(xiàn)實需要作為重要指向和強(qiáng)大動力，可以大大增強(qiáng)學(xué)習(xí)的效果。
學(xué)習(xí)貴創(chuàng)新。知識經(jīng)濟(jì)催生出學(xué)習(xí)型社會。現(xiàn)代科技特別是信息技術(shù)的不斷發(fā)展，推動著學(xué)習(xí)形式與內(nèi)容的創(chuàng)新。這就需要人們樹立終身學(xué)習(xí)的理念，把學(xué)習(xí)作為相伴終生的習(xí)慣與興趣，真正做到活到老、學(xué)到老；樹立團(tuán)隊學(xué)習(xí)的理念，把個人的學(xué)習(xí)融入團(tuán)隊的學(xué)習(xí)之中，推動大家都來學(xué)習(xí)，通過學(xué)習(xí)形成團(tuán)隊共同的知識價值系統(tǒng)。同時，樹立全民學(xué)習(xí)的理念，把學(xué)習(xí)作為強(qiáng)國富民的根本方略，形成全民學(xué)習(xí)的良好氛圍。
對于領(lǐng)導(dǎo)干部來說，學(xué)習(xí)是提高素質(zhì)、增長才干的重要途徑，是做好各項工作的重要基礎(chǔ)。但任務(wù)繁重、公務(wù)繁忙，又使領(lǐng)導(dǎo)干部很難有大量時間用于學(xué)習(xí)。怎么辦呢？只能想辦法擠時間學(xué)。在這個問題上，宋代政治家、文學(xué)家歐陽修倡導(dǎo)利用“三上”的時間，即把“馬上、枕上、廁上”的點(diǎn)滴時間用于學(xué)習(xí)和思考。這種精神值得提倡。領(lǐng)導(dǎo)干部應(yīng)大力弘揚(yáng)勤奮學(xué)習(xí)、學(xué)以致用的良好風(fēng)氣，盡可能地減少應(yīng)酬、克服惰性，爭取每天都拿出一定的時間去讀書學(xué)習(xí)。持之以恒地這樣做，定會受益無窮。
【關(guān)鍵詞】 表面增強(qiáng)激光解吸/離子化/飛行時間質(zhì)譜；蛋白質(zhì)陳列分析；肝腫瘤；腫瘤細(xì)胞，培養(yǎng)的；差異蛋白
Analysis of different protein expressions in different liver cell strains in vitro using SELDI
【Abstract】 AIM: To examine the differential expressions of proteins in hepatoma cell line (HepG2)，hepatoma cell line transfected by HBV （HepG2.2.15）compared with normal liver cell line(LO2) by using surfaceenhanced laser desorption/ionization timeofflight mass spectrometry (SELDITOFMS)， so as to establish a foundation for further studying on the mechanism of hepatoma at the protein level. METHODS: The 3 types of cells above mentioned were cultured as general and collected when they were in good conditions. After cell disruption， SELDITOFMS was employed to detect the differential expressions of proteomes of HepG2， HepG 2.2.15 and LO2. RESULTS: Ninetyone proteins were captured by WCX2 array. Compared with normal liver cell lines， in the segments from Mr 5000 to 15 000， proteins in the HepG2 and HepG2.2.15 showed apparent changes， in which 2 proteins expressions were increased in carcinoma cells， the other 5 decreased. Nine proteins in HepG2 were increased and 10 proteins in HepG 2.2.15 were increased. CONCLUSION: The SELDI ProteinChip technology can be a desired method in detecting the biological markers in the earlier period of hepatoma. This method is of convenience， high sensitivity， and good reproducibility. The biological tags of tissuespecific proteins we found have a potential applying value in the early diagnosis of hepatoma. These tags are also meaningful in screening and identifying signal proteins from serum and tissue specimen in different types of hepatoma. Certain foundation has been established in studying the etiopathogenesis of hepatoma at the level of proteins， as well as the searching of new therapeutic target sites.
【Keywords】 SELDITOFMS; protein array analysis; liver neoplasms; tumor cells， cultured; distinct protein
【摘要】 目的： 運(yùn)用表面增強(qiáng)激光解吸/離子化/飛行時間質(zhì)譜(SELDITOFMS) 技術(shù)，檢測體外培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞株（HepG2），轉(zhuǎn)染乙肝病毒的肝癌細(xì)胞株（HepG2.2.15）與正常肝細(xì)胞株（LO2）蛋白質(zhì)的差異表達(dá)，篩選肝細(xì)胞癌的標(biāo)志蛋白，為進(jìn)一步研究肝癌發(fā)病的蛋白質(zhì)組學(xué)機(jī)制奠定基礎(chǔ). 方法： 常規(guī)培養(yǎng)上述3種細(xì)胞，細(xì)胞狀態(tài)良好時收集細(xì)胞，裂解細(xì)胞后采用 SELDITOFMS技術(shù)用WCX2芯片檢測HepG2， HepG2.2.15， LO2細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)組學(xué)的差異表達(dá). 結(jié)果： WCX2芯片共捕獲91個蛋白，在Mr 5000~15 000區(qū)段，與正常肝細(xì)胞株比較，有7個蛋白質(zhì)在兩種肝癌細(xì)胞中出現(xiàn)明顯變化，其中2個蛋白在肝癌細(xì)胞中表達(dá)量增高，5個蛋白在肝癌細(xì)胞中表達(dá)量降低；另外兩種肝癌細(xì)胞株也有其各自的標(biāo)志蛋白，9個蛋白分子在HepG2表達(dá)量增高，10個蛋白分子在HepG2.2.15表達(dá)量增高. 結(jié)論： SELDI蛋白芯片技術(shù)檢測可作為檢測肝癌早期生物標(biāo)記的方法，它簡便，敏感性高，重復(fù)性好，本文發(fā)現(xiàn)的這些組織特異性蛋白生物標(biāo)記對肝癌的早期診斷有潛在的應(yīng)用價值，對我們從血清或組織標(biāo)本中篩選和鑒定不同型別肝癌細(xì)胞之間的標(biāo)志蛋白有重要意義，從而為從蛋白質(zhì)水平研究肝癌的發(fā)病機(jī)制及新的治療靶位的尋找奠定了一定的基礎(chǔ).
【關(guān)鍵詞】 表面增強(qiáng)激光解吸/離子化/飛行時間質(zhì)譜；蛋白質(zhì)陳列分析；肝腫瘤；腫瘤細(xì)胞，培養(yǎng)的；差異蛋白
0引言
原發(fā)性肝癌(HCC)在我國是常見的惡性腫瘤之一，其死亡率在部分城市中占惡性腫瘤死因的第二位. 每年有11萬人死于肝癌，占全世界肝癌死亡人數(shù)的45%. 肝癌早期沒有明顯體征，多數(shù)病人確診時已屬晚期，難以治愈，死亡率很高. 所以，對于肝癌的早期診斷，在無癥狀的人群中發(fā)現(xiàn)早期病例，對控制肝癌的病死率有現(xiàn)實的意義. 因此，研究并尋找有價值的預(yù)警肝癌的標(biāo)志物，成為進(jìn)一步提高肝癌臨床治療水平的關(guān)鍵. 任何疾病在出現(xiàn)病理變化之前，細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)在成分和數(shù)量上都會有相應(yīng)的改變，癌癥的發(fā)生是一個多基因多階段多因子的動力學(xué)過程，HCC也不例外，目前對肝癌發(fā)生機(jī)制的研究大都是在基因水平，但是mRNA的水平并不能真正代表所表達(dá)的蛋白質(zhì)水平，因此，要求對生物功能的執(zhí)行者蛋白質(zhì)進(jìn)行研究.
蛋白質(zhì)組是指一個基因組、一個細(xì)胞或組織或一種生物體所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)［1］. 蛋白質(zhì)組學(xué)（Proteomics）是蛋白質(zhì)組概念的延伸，是在整體水平上研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)組成及其活動規(guī)律的學(xué)科. 蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)為研究腫瘤標(biāo)志物與腫瘤進(jìn)展轉(zhuǎn)移研究提供良好的技術(shù)平臺， 為研究開辟了新的手段和視角. SELDI蛋白質(zhì)芯片技術(shù)是近年來新興的一種蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，它具有簡單、快捷、靈敏等特點(diǎn)，可以檢測分子量在Mr 500~500 000之間的蛋白或多肽，而且所需樣本體積小（0.5~400 μL）［2-3］. 我們應(yīng)用細(xì)胞裂解液裂解體外培養(yǎng)的3種細(xì)胞（LO2， HepG2， HepG2.2.15），進(jìn)行了表面增強(qiáng)激光解吸/離子化/飛行時間質(zhì)譜技術(shù)（SELDITOFMS）分析，初步建立了正常肝細(xì)胞、肝癌細(xì)胞與轉(zhuǎn)染乙肝病毒的肝癌細(xì)胞的蛋白表達(dá)圖譜［4］，發(fā)現(xiàn)了一系列（信噪比）差異表達(dá)的蛋白，為今后從血清或肝癌組織中篩選標(biāo)志蛋白提供科學(xué)依據(jù).
1材料與方法
1.1材料正常肝細(xì)胞株（LO2）購自中科院上海細(xì)胞庫；肝癌細(xì)胞株（HepG2）及攜帶乙肝病毒的肝癌細(xì)胞株（HepG2.2.15）由第四軍醫(yī)大學(xué)吳力克主任醫(yī)師贈送. HPLC水，乙晴，三氟乙酸，白芥子酸（SPA），TritonX100，尿素，4羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES），表面活性劑（CHAPS）均購自美國Sigma公司，蛋白質(zhì)芯片時間質(zhì)譜分析儀（PBSⅡC）及WCX2（弱陽離子交換芯片）購自美國Ciphergen Biosystems公司.
1.2方法
1.2.1細(xì)胞總蛋白質(zhì)的提取LO2， HepG2細(xì)胞采用含100 mL/L胎牛血清的1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，HepG2.2.15細(xì)胞另外加入終濃度200 g/L的G418，細(xì)胞長成單層后，用無菌細(xì)胞刮刀刮取細(xì)胞，PBS洗3次，加入裂解液（8 mol/L urea， 40 g/L CHAPS， 40 mmol/L TrisHCl， pH 7.4）200 μL， 4℃劇烈震蕩30 min， 20 817 g離心30 min. 上清采用日本日立的 Gene Spec V蛋白核酸分析系統(tǒng)測定蛋白濃度，用裂解液調(diào)節(jié)至所有樣品濃度為2 g/L，其余上清分裝-86℃?zhèn)溆? 每種細(xì)胞收獲3次，以排除組間差別. 每份樣品至少在2個以上的同種芯片上檢測，以排除不同芯片間的差異.
1.2.2WCX2蛋白芯片操作步驟將芯片裝入蛋白工作平臺，每孔加入200 μL結(jié)合/洗脫緩沖液（50 mmol/L NaAc， pH 4.0）預(yù)處理芯片，室溫下200 r/min振蕩5 min，棄緩沖液，重復(fù)上述操作1次. 每孔加入50 μL 1∶2稀釋的樣品，劇烈震蕩，室溫孵育1 h. 棄掉樣品，每孔用200 μL結(jié)合/洗滌緩沖液洗滌2次，每次震蕩5 min. 棄去孔中液體，每孔加入200 μL HPLC 水，立刻甩出. 從蛋白工作平臺中取出芯片，空氣中干燥，每孔加入0.5 μL EAM（SPA中加入75 μL乙氰和75 μL 10 mL/L三氟乙酸）重復(fù)1次. 干燥后用蛋白質(zhì)芯片閱讀機(jī)進(jìn)行質(zhì)譜分析.
1.2.3數(shù)據(jù)采集和結(jié)果分析用加有Allinone標(biāo)準(zhǔn)分子量蛋白的NP20芯片校正質(zhì)譜儀，儀器參數(shù)設(shè)置如下： 激光強(qiáng)度220，檢測敏感度10，優(yōu)化分子質(zhì)量范圍為Mr 2000~10 000，最高分子量為Mr 50 000，采用Ciphergen ProteinChip 3.0版本的分析軟件自動采集數(shù)據(jù)，然后用Biomarker Wizard 軟件分析LO2， HepG2， HepG2.2.15細(xì)胞的蛋白質(zhì)譜差異.
2結(jié)果
2.1重復(fù)性試驗為了保證試驗結(jié)果的可靠性，我們首先進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)為1010/L，樣品蛋白濃度為2 g/L以減少細(xì)胞本身蛋白的差異；同時每種細(xì)胞收獲3次，以排除組間差別；每份樣品至少在同種芯片3個以上不同點(diǎn)進(jìn)行檢測，以排除不同芯片點(diǎn)之間的差異. 然后用SELDITOFMS對樣品孔進(jìn)行測定，經(jīng)質(zhì)譜分析后選擇了8個蛋白峰，測變異系數(shù)，結(jié)果顯示其M/Z及強(qiáng)度的CV分別為1%， 5%，分析結(jié)果表明試驗重復(fù)性好，結(jié)果可靠.
2.2差異蛋白的比較
2.2.1LO2， HepG2， HepG2.2.15三者比較明顯差異蛋白峰共7個，其中Mr 7945， 7979在肝癌細(xì)胞中表達(dá)增高， 5818， 8428， 10 106， 10 312， 11 084在肝癌細(xì)胞中表達(dá)降低（圖1）.
2.2.2肝癌細(xì)胞和轉(zhuǎn)染乙肝病毒的肝癌細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)差異HepG2， HepG2.2.15細(xì)胞差異蛋白峰共19個， 9個蛋白峰在肝癌細(xì)胞中表達(dá)增高，10個蛋白峰在肝癌細(xì)胞中表達(dá)降低（圖2）.
2.2.3差異蛋白質(zhì)的初步鑒定將發(fā)現(xiàn)的差異蛋白峰在Swiss蛋白數(shù)據(jù)庫中搜索（us.expasy.org/tools/tagident.html），發(fā)現(xiàn)Mr 11 084.0蛋白峰與鈣結(jié)合蛋白S100 A10相符. 其他幾種蛋白暫時尋找不到.
A： LO2細(xì)胞；B： HepG2.2.15細(xì)胞；C： HepG2細(xì)胞. 上部分為蛋白峰表達(dá)情況: 橫坐標(biāo)表示相對分子量，縱坐標(biāo)表示蛋白質(zhì)峰的強(qiáng)度；Mr 11 084.6， 10 106.4蛋白在LO2中表達(dá)最高，在HepG2中次之，在HepG2.2.15中最低. 下部分為蛋白質(zhì)圖譜的模擬凝膠圖： Mr 11 084.6， 10 106.4兩條帶是LO2， HepG2.2.15和HepG2細(xì)胞的差異蛋白.
圖13種細(xì)胞在Mr 10 000~11 500區(qū)段的蛋白質(zhì)檢測結(jié)果（略）
A: Chip 19C G2; B: Chip 19H 2.2.15. 橫坐標(biāo)表示相對分子量，縱坐標(biāo)表示蛋白質(zhì)峰的強(qiáng)度. Mr 10 106.4， 11 084.0， 11 658.4蛋白在HepG2中高表達(dá)，在HepG2.2.15中低表達(dá).
圖2HepG2， HepG2.2.15細(xì)胞在Mr 10 000~12 000區(qū)段的蛋白質(zhì)檢測結(jié)果（略）
3討論
腫瘤早期就可在蛋白質(zhì)水平出現(xiàn)細(xì)微但重要的組合改變［5］，近來研究表明，腫瘤性疾病從蛋白質(zhì)組學(xué)的角度又可以被認(rèn)為是一種蛋白質(zhì)缺陷病，其發(fā)生過程中有多種蛋白會發(fā)生異常變化. 從組織增生產(chǎn)生原位癌到產(chǎn)生癌變的過程中，有不同的功能性蛋白的參與；轉(zhuǎn)移也是多步驟復(fù)雜連續(xù)的過程， 與轉(zhuǎn)移有關(guān)的特殊基因受到激活并有多種水解酶的參與. 總之， 腫瘤在發(fā)生發(fā)展轉(zhuǎn)移的過程中， 在分子水平有不同的功能性蛋白參與， 并且功能性蛋白很可能在各個環(huán)節(jié)相互協(xié)調(diào)共同表達(dá). 蛋白表達(dá)異常不僅包括蛋白表達(dá)量的增加或減少，還包括蛋白翻譯后加工上的改變，從而導(dǎo)致腫瘤組織表達(dá)的蛋白質(zhì)譜(protein profile) 的改變. 因此利用蛋白質(zhì)組學(xué)方法檢測蛋白質(zhì)譜的變化可以更加準(zhǔn)確地診斷腫瘤及了解腫瘤的發(fā)病機(jī)制.
臨床上現(xiàn)有的HCC標(biāo)志物眾多，但尚無單一標(biāo)志物能夠診斷所有HCC. 這就需要探索一種新的技術(shù)以發(fā)現(xiàn)早期腫瘤標(biāo)志物. SELDI蛋白質(zhì)芯片技術(shù)可檢測疾病進(jìn)展中不同階段血清中多肽量的變化，翻譯后修飾的改變或某些多肽的聚糖結(jié)構(gòu)變化，為HCC腫瘤標(biāo)志物的進(jìn)展提供了一個新的方法，它靈敏度高、特異性好、重復(fù)性強(qiáng)、操作簡單且微量化［6］，可同時檢測血清中的多種蛋白質(zhì)已被應(yīng)用于檢測多種生物學(xué)樣品.
體外培養(yǎng)的細(xì)胞株雖然不能完全反映體內(nèi)細(xì)胞的生長狀態(tài)和生物學(xué)活性，但它具有成分單一、均質(zhì)性好、實驗條件容易控制等優(yōu)點(diǎn). 尤其在做對比性研究時可避免由組織細(xì)胞成分復(fù)雜，細(xì)胞異質(zhì)性高等缺點(diǎn)造成的結(jié)果不真實和不可靠［7］. 我們培養(yǎng)了LO2， HepG2和HepG2.2.15細(xì)胞，裂解細(xì)胞蛋白定量后SELDITOFMS分析蛋白表達(dá)的差異. WCX2芯片，用于分析正電荷蛋白，弱陽離子碳化合物構(gòu)成活性位點(diǎn)，與樣品中賴、精或組氨酸反應(yīng)，它捕獲的蛋白pI一般大于4. 我們在分子量Mr 3000~30 000范圍內(nèi)，共捕獲91個蛋白峰. 其中肝癌細(xì)胞株與正常肝細(xì)胞株差異蛋白共7個，不同亞型肝癌細(xì)胞與正常肝細(xì)胞比較有共同的差異蛋白，說明在肝癌的發(fā)生或發(fā)展過程中涉及到一些共同的蛋白質(zhì)改變；我們對不同類型的肝癌細(xì)胞株差異蛋白質(zhì)進(jìn)行分析，結(jié)果HepG2， HepG2.2.15細(xì)胞差異蛋白峰共19個，表明不同肝癌細(xì)胞株也具有特異的差異蛋白，這對我們從血清或組織標(biāo)本中篩選和鑒定不同型別肝癌細(xì)胞之間的標(biāo)志蛋白有重要意義.
這些組織特異性蛋白生物標(biāo)記對我們從血清或組織標(biāo)本中篩選或鑒定標(biāo)志蛋白有重要意義，對肝癌的早期診斷有潛在的應(yīng)用價值，更主要的是為研究肝細(xì)胞癌變機(jī)制提供了一個基礎(chǔ)，而且這些蛋白有可能為肝癌治療提供新的靶位，可以進(jìn)行RNA干擾來阻斷其高表達(dá)或通過基因?qū)雭泶龠M(jìn)低表達(dá)蛋白的表達(dá).
用Swiss蛋白數(shù)據(jù)庫中檢索分子量和pI值匹配的蛋白質(zhì)發(fā)現(xiàn)Mr 11 084蛋白峰可能為鈣結(jié)合蛋白S100 A10. S100蛋白家族是一個有21個成員的鈣結(jié)合蛋白家族， S100蛋白通過對鈣離子的調(diào)節(jié)及與靶蛋白的相互作用，在體內(nèi)發(fā)揮多種生物學(xué)功能. 研究發(fā)現(xiàn) S100家族與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，它們參與細(xì)胞周期調(diào)控，在多種腫瘤中表達(dá)異常，并與腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān). S100 A10在腫瘤發(fā)生中的作用還不確定，它可能與Annexin II（p36）組成復(fù)合物，抑制p36磷酸化，參與細(xì)胞周期調(diào)控［8］. 在肝癌的發(fā)生中S100 A10可能通過p36起作用，它在肝癌細(xì)胞 HEPG2中低表達(dá)，抑制p36磷酸化的作用降低，從而抑制細(xì)胞增殖的作用降低，可能引起細(xì)胞生長失控而致癌.
從理論上講，肝癌在發(fā)生、發(fā)展過程中其細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)變化可以反應(yīng)到血清中，可從體外培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞株中篩選出部分與癌病人血清相一致的標(biāo)志蛋白，有些改變可能只存在于細(xì)胞內(nèi)而不分泌或代謝到細(xì)胞外，這部分蛋白可能是與癌癥的發(fā)病密切相關(guān)的功能蛋白和調(diào)節(jié)蛋白.
目前，我們正進(jìn)一步研究HBV感染攜帶者與HCC患者及正常人血清蛋白質(zhì)的差異表達(dá)，結(jié)合體外培養(yǎng)細(xì)胞株的研究通過對比分析進(jìn)一步篩選差異蛋白，下一步我們將蛋白純化后進(jìn)行序列測定，應(yīng)用串聯(lián)質(zhì)譜分析鑒定特定的蛋白，以期確認(rèn)肝癌的標(biāo)志蛋白和功能蛋白，為臨床肝癌的診斷提供新的思路，以期使肝癌的血清學(xué)診斷成為可能.
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【摘要】 目的 觀察不同濃度rhEPO對神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)增殖的影響，探討rhEPO聯(lián)合神經(jīng)干細(xì)胞移植治療脊髓損傷修復(fù)的影響。方法 用不同濃度(5、50、500 U/mL)rhEPO干預(yù)從新生SD大鼠(出生24 h以內(nèi))取材來的神經(jīng)干細(xì)胞，分別檢測每組神經(jīng)干細(xì)胞克隆形成率;在不同時間分別用MTT法檢測細(xì)胞增殖率;神經(jīng)干細(xì)胞分化的免疫細(xì)胞化學(xué)染色及計數(shù)。結(jié)果 添加rhEPO各實驗組細(xì)胞增殖較快最終神經(jīng)球的數(shù)量多于對照組，以50 U/mL rhEPO組作用顯著;添加rhEPO各實驗組的細(xì)胞生長曲線均高于對照組，尤其是50 U/mL rhEPO組顯著高于對照組;NSE和GFAP免疫細(xì)胞化學(xué)染色和計數(shù)結(jié)果顯示，50 U/mL rhEPO組中NSE免疫陽性細(xì)胞明顯多于對照組(P
【關(guān)鍵詞】 神經(jīng)干細(xì)胞;rhEPO;體外培養(yǎng);增殖
Abstract: Objective To observe the effect which multiplies in vitro raise to the nerve stem cell of different density rhEPO， and to discuss the influence of rhEPO， associated with nerve stem cell transplant， in curing spinal cord damage repair. Methods The present research firstly intervened the nerve stem cell， obtained from the newborn SD big mouse (born within 24hs)， with different density rhEPO (5， 50， 500 U/mL). Then， a distinctive examination of the rate of clone formation in each groups nerve stem cells was conducted. Afterwards， MTT method was used to examine the cell reproducibility in different times and nerve stem cell differentiations immunocytochemistry dyeing and counting. Results The cell multiplication in experimental groups which had added the EPO was quicker and the quantity of final nerve balls was larger than that in the control group， which was remarkable in 50 U/mLEPO group. The cell growth curve in experimental groups which had added the rhEPO was higher than that in the control group， which was also remarkable in 50 U/mL EPO group. The NSE and GFAP immunocytochemistry dyeing and the counting results showed that the NSE immunity masculine cells in the 50 U/mL EPO group were obviously more than that in the control group (P
Key words:nerve stem cell; rhEPO; in vitro raise; multiplication
神經(jīng)干細(xì)胞(nerve stem cell，NSCs)是一種具有復(fù)制能力和多向分化潛能的原始細(xì)胞，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的修復(fù)研究中逐漸引起醫(yī)學(xué)界的關(guān)注。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)干細(xì)胞不僅存在于 胚胎腦組織，而且已發(fā)育成熟的 內(nèi)也存在神經(jīng)干細(xì)胞[1]。正常情況下這些NSCs處于“靜止”或“休眠”狀態(tài)，在特定因素的作用下，例如損傷或刺激，其分裂、分化的潛能就被激活，從而出現(xiàn)增殖現(xiàn)象。堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)對離體神經(jīng)干細(xì)胞具有一定的增殖效應(yīng)，但其作用有限[2]。因此，如何更有效的促進(jìn)NSCs的增殖是推動其在治療過程中的重要方法。本實驗對重組人促紅細(xì)胞生成素(rhEPO)和bFGF聯(lián)合應(yīng)用促進(jìn)NSCs的體外增殖效應(yīng)進(jìn)行初步探討。
1 材料與方法
1.1 主要材料
新生SD大鼠(出生24 h以內(nèi))、DMEM/F12培養(yǎng)基、無血清培養(yǎng)添加劑B27(美國Gibco)、bFGF(北京雙鷺生物制品公司)、EGF(premega公司)、胰蛋白酶、谷氨酰胺(Sigma)， MTT(噻唑蘭)、DMSO(二甲基亞砜)，及其他相關(guān)試劑。
1.2 方法
1.2.1 神經(jīng)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)
①新生SD大鼠經(jīng)75%酒精消毒，無菌條件下將前腦完整取出，借助顯微鏡在視交叉平面和海馬平面各做一道冠狀切口，留取自視交叉至海馬約2 mm厚的腦塊。將留取的腦塊冠狀面朝上放置，然后在側(cè)腦室外側(cè)做兩道矢狀切口，并且在胼胝體上方做一水平切口，留取中間圍繞側(cè)腦室前角的腦塊。此部位包含側(cè)腦室前角室下帶(subventricular zone，SVZ)，富含神經(jīng)干細(xì)胞。②去除軟腦膜和脈絡(luò)叢組織。將腦組織轉(zhuǎn)移到另一培養(yǎng)皿，用剪刀反復(fù)剪切至約1 mm3大小組織塊，加入DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基2～3 mL，用吸管反復(fù)吹打，制成細(xì)胞懸液。③將細(xì)胞懸液用200 目銅網(wǎng)過濾，去除殘留未分散組織，將濾液移入無菌10 mL離心管。離心機(jī)將過濾的細(xì)胞懸液以1 000 r/min離心10 min，以便收集細(xì)胞。④吸管小心吸除上清液體，將沉淀的細(xì)胞重懸于2 mL含B27和20 ng/mL bFGF，20 ng/mL EGF的DMEM/F12培養(yǎng)基中，計數(shù)板計數(shù)后以2～5×105個細(xì)胞/mL接種于25 cm3 培養(yǎng)瓶。置37 oC，5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。⑤培養(yǎng)4～5 d后，將含細(xì)胞的培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至離心管中，1 000 r/min離心10 min，收集細(xì)胞。同樣方法小心吸除上清液體，用相同培養(yǎng)液重懸細(xì)胞后，接種于更換的培養(yǎng)瓶中，繼續(xù)培養(yǎng)。每5～7天換液1次。⑥培養(yǎng)2周左右時見神經(jīng)干細(xì)胞克隆形成，3～4 周見大量神經(jīng)干細(xì)胞球。以后用機(jī)械法分散神經(jīng)球方法進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.2.2 神經(jīng)干細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
將細(xì)胞移入無菌10 mL離心管，以1 000 r/min轉(zhuǎn)速離心10 min，收集細(xì)胞。吸除上清液體，向沉淀中加入3倍體積的0.25%胰蛋白酶/EDTA(1：1)消化液，37 ℃水浴5 min。用吸管輕輕吹打成單細(xì)胞懸液(此步驟時間不超過5 min)。加入1/10體積的血清終止消化。以2～5×105個細(xì)胞/mL細(xì)胞濃度繼續(xù)培養(yǎng)，培養(yǎng)基成分同上。
1.3 實驗分組
取第3代神經(jīng)干細(xì)胞制備單細(xì)胞懸液，分別接種于含rhEPO 5、50、500 U/mL的無血清培養(yǎng)基中，同時設(shè)不含rhEP0的對照組，其中實驗組、對照組無血清培養(yǎng)基含bFGF濃度均為20 ng/mL。將各組神經(jīng)干細(xì)胞懸液置于5%CO2、37 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。每組均設(shè)復(fù)孔，實驗重復(fù)3次。
1.4 檢測指標(biāo)
1.4.1 檢測神經(jīng)干細(xì)胞克隆形成率
將各組細(xì)胞作梯度倍數(shù)稀釋接種于25 cm3培養(yǎng)皿中靜置培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)7 d時，取對照組和各實驗組培養(yǎng)皿放置在一張帶網(wǎng)格的透明膠片上，在倒置顯微鏡下計數(shù)克隆數(shù)，計算公式如下:
克隆形成率(%)=單位面積克隆數(shù)/單位面積接種細(xì)胞數(shù)×100。
1.4.2 MTT法檢測細(xì)胞的活性
將各組細(xì)胞以每孔大約1.0×105個細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板中，每孔體積150 μL，每日檢測OD值。
1.4.3 神經(jīng)干細(xì)胞分化的免疫細(xì)胞化學(xué)染色及計數(shù)
將各組神經(jīng)干細(xì)胞接種于6孔培養(yǎng)板中(預(yù)先置有涂多聚賴氨酸的蓋玻片)，每孔平均接種50 個神經(jīng)球，加入有血清培養(yǎng)基3.0 mL，靜置培養(yǎng)，每3天換液。10 d后收集貼有細(xì)胞的蓋玻片，分別做NSE、GFAP免疫細(xì)胞化學(xué)染色。每個標(biāo)本隨機(jī)取20 個視野，普通光鏡下觀察并計數(shù)每個視野的陽性細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的百分率，取平均值。
1.5 統(tǒng)計分析
數(shù)據(jù)以±s表示，采用SPSS統(tǒng)計學(xué)軟件處理，各組率的比較采用χ2檢驗法，各組均數(shù)比較采用方差分析及q檢驗。
2 結(jié) 果
2.1 細(xì)胞的觀察及克隆形成率檢測結(jié)果
對照組形成的神經(jīng)球數(shù)量無明顯變化，神經(jīng)球的細(xì)胞折光性較弱，邊緣細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則，可見有絲絮狀物和較多細(xì)胞碎片。而添加rhEPO各實驗組細(xì)胞增殖較快，48 h可見較多的成對或3～5成群細(xì)胞出現(xiàn)，最終神經(jīng)球的數(shù)量多于對照組，以50 U/mL rhEPO組作用顯著。
2.2 MTT檢測結(jié)果
MTT結(jié)果顯示，添加rhEPO各實驗組的細(xì)胞生長曲線高于對照組，尤其是50 U/mL rhEPO組顯著高于對照組。
2.3 細(xì)胞分化比例檢測及顯微測量結(jié)果
對照組神經(jīng)球貼壁率低，可見許多細(xì)胞團(tuán)漂浮在培養(yǎng)基中，最終漂浮的細(xì)胞團(tuán)變?yōu)榧?xì)胞碎片。添加rhEPO各實驗組中，部分神經(jīng)球貼壁困難，一旦神經(jīng)球貼壁，隨即有突起長出，胞體和突起生長較快，雙突起和多突起細(xì)胞多于對照組，第2 d即可見部分細(xì)胞建立突觸聯(lián)系。3 d細(xì)胞多數(shù)可形成較密集網(wǎng)絡(luò)，胞體較豐滿，細(xì)胞突起生長快，可見多角形細(xì)胞。對照組細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)稀疏，細(xì)胞胞體較小，突起變短、變粗，有的胞體內(nèi)可見空泡。顯微測量結(jié)果顯示，50 U/mL rhEPO組中細(xì)胞突起長度顯著高于對照組(P
NSE和GFAP免疫細(xì)胞化學(xué)染色和計數(shù)結(jié)果顯示，50 U/mL rhEPO組中NSE免疫陽性細(xì)胞明顯多于對照組(P
3 討 論
最近的研究證實，rhEPO在體內(nèi)和體外的多種神經(jīng)細(xì)胞損傷模型中均有抗凋亡作用。在運(yùn)動神經(jīng)元培養(yǎng)中，rhEPO能抑制因血清缺乏或紅藻氨酸誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。神經(jīng)細(xì)胞rhEPO受體激活后，通過干擾JAK2和核轉(zhuǎn)錄因子可抑制N-甲基-D-天(門)冬氨酸(NMDA)和NO誘導(dǎo)的凋亡[3]。rhEPO還可以通過調(diào)節(jié)凋亡過程中不同基因的表達(dá)發(fā)揮抗凋亡作用。在自由基損傷模型中，rhEPO可調(diào)節(jié)神經(jīng)膜外部分的磷脂酰絲氨酸(PS)殘基，并通過調(diào)節(jié)線粒體的膜電位和細(xì)胞色素C的釋放以及caspase8、caspase1和caspase3活化酶的活性，增加絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(Akt)的活性，促進(jìn)凋亡的蛋白磷酸化而保持DNA的完整性[4]。rhEPO在神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)抑制細(xì)胞凋亡的機(jī)制可能與在紅細(xì)胞內(nèi)的機(jī)制相同。
rhEPO對神經(jīng)細(xì)胞的許多功能活動均具有調(diào)節(jié)作用，例如鈣離子外流、膜的去極化、神經(jīng)遞質(zhì)的合成以及細(xì)胞的凋亡等。rhEPO可能通過抑制或刺激神經(jīng)遞質(zhì)的合成來參與突觸可塑性的調(diào)節(jié)。在PC12細(xì)胞中，rhEPO通過激活鈣離子通道刺激多巴胺的釋放和酪氨酸羥化酶的活性，誘導(dǎo)膜的去極化，增加一氧化氮(NO)的合成，促進(jìn)神經(jīng)遞質(zhì)(r-氨基丁酸、乙酰膽堿和多巴胺等)的釋放[5]。在大鼠脊髓損傷和坐骨神經(jīng)損傷模型中，rhEPO能通過對突觸傳遞的直接作用而起到傷后即刻的神經(jīng)保護(hù)作用。
在海馬薄片培養(yǎng)中，rhEPO受體被激活后，通過激活JAK2抑制鈣離子介導(dǎo)的興奮性氨基酸釋放來實現(xiàn)對神經(jīng)元缺血的保護(hù)。最近有報道顯示，rhEPO能刺激T型電壓依賴性鈣通道的活性，人類成神經(jīng)細(xì)胞瘤的膜片鉗研究證實，有T型鈣通道的表達(dá)。當(dāng)把 rhEPO加入到培養(yǎng)基中，可以觀察到鈣通道的最大峰值電流增加。因此，rhEPO可以通過胞膜上的T型電壓依賴性鈣通道增加鈣離子流，進(jìn)而影響神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)鈣離子的平衡來產(chǎn)生對神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用[6]。
rhEPO的作用并不僅限于直接影響細(xì)胞的生存，在細(xì)胞培養(yǎng)中也展示了其營養(yǎng)作用。rhEPO能啟動細(xì)胞的分化，阻止細(xì)胞的死亡和增強(qiáng)膽堿乙?；D(zhuǎn)移酶的活性。這些發(fā)現(xiàn)說明，rhEPO抑制神經(jīng)元凋亡是其短暫的作用，對神經(jīng)元的營養(yǎng)作用則是長期的。
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摘要：高校學(xué)生干部是學(xué)校教育和管理的一支不可缺少的依靠力量，是學(xué)校學(xué)生管理措施的執(zhí)行者，是教師的得力助手，因此學(xué)生干部的培養(yǎng)具有重要意義。從當(dāng)前高校學(xué)生干部現(xiàn)狀出發(fā)，深入剖析高校學(xué)生干部隊伍培養(yǎng)過程中存在的問題，并提出了高校學(xué)生干部培養(yǎng)的有效對策。
關(guān)鍵詞：高校學(xué)生干部；培養(yǎng)過程；問題
中圖分類號：G645.5 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：1673－291X（2011）23－0261－02
“十年樹木，百年樹人”，育人是大學(xué)的重要職能。高校學(xué)生干部培養(yǎng)既是“自我教育、自我培養(yǎng)”功能的體現(xiàn)，也是學(xué)校育人目標(biāo)實現(xiàn)的有效途徑。高校學(xué)生干部在學(xué)校教育和管理工作中起著非常重要的骨干作用，他們作為高校學(xué)生中的骨干分子，是學(xué)校各項教育管理工作的具體參與者和實施者，是聯(lián)系學(xué)校和班級、老師和學(xué)生的紐帶與橋梁，在高校學(xué)生工作中扮演著重要的角色。因此，剖析高校學(xué)生干部培養(yǎng)實際的現(xiàn)狀、存在問題及其有效培養(yǎng)路徑，具有重要的現(xiàn)實意義。
一 、當(dāng)前高校學(xué)生干部隊伍的現(xiàn)狀及存在的主要問題
（一）功利化趨勢嚴(yán)重，動機(jī)不純
在市場經(jīng)濟(jì)和社會發(fā)展的某些負(fù)面影響下，很多高校學(xué)生干部在工作中功利取向越來越嚴(yán)重，他們當(dāng)學(xué)生干部往往是基于自己在評優(yōu)評干、發(fā)展黨員等方面的需要，把干部的頭銜當(dāng)做自己獲取某種利益的工具和通往成功的捷徑，而沒有認(rèn)識到學(xué)生干部是學(xué)生“自我管理、自我服務(wù)、自我教育”的平臺，是促進(jìn)學(xué)生成長成才的重要途徑。在工作過程中，不能正確處理好“干群”關(guān)系，服務(wù)意識淡薄，務(wù)虛不務(wù)實，在同學(xué)中擺架子，缺乏腳踏實地的工作精神和為同學(xué)服務(wù)的觀念。
（二）偏重工作，不能正確處理學(xué)習(xí)與工作的關(guān)系
很多學(xué)生干部過于強(qiáng)調(diào)個人工作能力的重要性，而對專業(yè)學(xué)習(xí)沒有給予足夠的重視。他們往往把大部分精力都放在工作上，不僅課余時間全部用于工作，甚至有時上課時間還在考慮工作問題，嚴(yán)重影響到專業(yè)課的學(xué)習(xí)。這導(dǎo)致他們學(xué)習(xí)成績不佳、專業(yè)技能不好，不僅不能很好地開展工作，還容易失去干部威信，不能成為有號召力的干部。
（三）缺乏創(chuàng)新意識
有的學(xué)生干部成績優(yōu)秀、辦事牢靠，但在工作中缺乏主觀能動性和創(chuàng)造意識，不能根據(jù)實際情況隨機(jī)應(yīng)變。對于老師分配的任務(wù)能夠順利地完成，但老師沒想到的他們往往也想不到。按部就班，以前怎么做現(xiàn)在就怎么做，上面怎么說，下面就怎么做，創(chuàng)新意識差，不能根據(jù)新形勢、新情況，提出新的工作方法。創(chuàng)新是一個民族的靈魂，是一個高素質(zhì)人才必備的素質(zhì)，也是高校對學(xué)生干部培養(yǎng)的一個重要內(nèi)容。缺乏創(chuàng)新意識會使學(xué)生活動缺乏生機(jī)和活力，使工作沒有效率。
（四）本位意識強(qiáng)，缺乏團(tuán)隊精神
學(xué)生干部在工作中應(yīng)該注重發(fā)揚(yáng)團(tuán)隊精神。而現(xiàn)在的學(xué)生干部大多數(shù)是獨(dú)生子女，比較獨(dú)立，但往往以自我為中心，對別人缺乏關(guān)心和理解，表現(xiàn)在工作上就是本位意識過強(qiáng)，喜歡充當(dāng)指揮者，而不喜歡被別人領(lǐng)導(dǎo)，缺乏合作精神和團(tuán)隊精神。由于團(tuán)隊精神的缺乏，會直接導(dǎo)致學(xué)生干部隊伍力量的削弱。結(jié)果造成工作不能從客觀實際出發(fā)，易帶個人的感彩，甚至發(fā)生互相拆臺現(xiàn)象，不利于學(xué)生干部隊伍建設(shè)。
（五）工作中原則性不強(qiáng)
學(xué)生干部應(yīng)該有自己的做事原則，勇于承擔(dān)責(zé)任。但有的學(xué)生干部受社會不良風(fēng)氣的影響，從自己的利益出發(fā)，在工作過程中缺乏原則性，只求自己不做錯事，對其他同學(xué)的違紀(jì)亂紀(jì)現(xiàn)象熟視無睹、知情不報。甚至個別學(xué)生干部利用自己的職權(quán)，拉幫結(jié)派，用義氣代替原則，缺乏起碼的是非觀念。
（六）缺乏自信，心理壓力過大
在社會和家庭的雙重壓力下，一些大學(xué)生產(chǎn)生了各種各樣的心理問題，學(xué)生干部具有學(xué)生和管理者的雙重身份，使得他們面對比普通學(xué)生更多的壓力，由于不善于自我排解和自我調(diào)整，他們往往不夠自信，遇到一點(diǎn)挫折就開始懷疑自己的能力。在工作上，學(xué)生干部往往要付出很多的時間，無形中減少了他們與周圍同學(xué)的交流，加上交際能力欠缺，容易導(dǎo)致與周圍同學(xué)關(guān)系不和諧、人際關(guān)系敏感。
二、 高校如何有效培養(yǎng)學(xué)生干部
（一）堅持原則，明確標(biāo)準(zhǔn)，精心挑選
在選拔的標(biāo)準(zhǔn)上，概括起來有“德”和“才”，而“德”是最重要的。在學(xué)生干部選拔問題上，在注重能力的同時更要注重道德品質(zhì)。要打破以學(xué)生背景為標(biāo)準(zhǔn)的傳統(tǒng)選拔思維，從思想、能力和心理素質(zhì)三個方面入手，制訂明確的選拔標(biāo)準(zhǔn)并嚴(yán)格遵守。其中思想素質(zhì)的高低是選拔的首要標(biāo)準(zhǔn)，一個沒有堅定的政治立場和良好的道德品質(zhì)的人是無法做到全心全意為同學(xué)服務(wù)的。能力素質(zhì)是選拔的主要標(biāo)準(zhǔn)，包括組織協(xié)調(diào)能力、協(xié)作社交能力、學(xué)習(xí)創(chuàng)新能力?？傮w而言，“德才兼?zhèn)洹笔沁x拔高質(zhì)量學(xué)生干部的標(biāo)準(zhǔn)，二者是統(tǒng)一的整體，不能偏廢，重視其一，或把兩者割裂都是錯誤的。此外，學(xué)生干部選拔有任命制、自薦制、選舉制、競選制等多種選舉方法，要靈活運(yùn)用。
（二）注重學(xué)生干部創(chuàng)新能力的培養(yǎng)
隨著素質(zhì)教育的推進(jìn)，學(xué)生干部創(chuàng)新能力的培養(yǎng)愈來愈重要。作為高素質(zhì)人才的大學(xué)生干部，不僅要會學(xué)習(xí)，還要敢于想、敢于創(chuàng)造。因此，學(xué)生工作者要努力培養(yǎng)學(xué)生干部的創(chuàng)新精神與實踐能力，鼓勵他們打破常規(guī)工作思路的束縛，做到思維創(chuàng)新，能力創(chuàng)新，理念創(chuàng)新。唯有創(chuàng)新，才有進(jìn)步、才有發(fā)展。因此，要為學(xué)生干部創(chuàng)新能力的培養(yǎng)提供良好的氛圍。培養(yǎng)學(xué)生干部創(chuàng)新能力離不開一個和諧的校園環(huán)境，還要充分發(fā)揮他們的主觀能動性，給他們留有一定的思維空間，讓他們有獨(dú)立思考的時間和空間，使他們在工作實踐中積累經(jīng)驗，增長才干。只有這樣，學(xué)生干部的創(chuàng)新潛力才有可能得到挖掘。
（三）建立有效的學(xué)生干部激勵機(jī)制
學(xué)生干部首先是學(xué)生，然后才是一名干部，他們在擔(dān)任學(xué)生干部的同時，花費(fèi)了許多學(xué)習(xí)時間和休息時間，義務(wù)為同學(xué)們服務(wù)。因此，要充分調(diào)動學(xué)生干部的積極性、主動性，對學(xué)生干部進(jìn)行有效的管理，除進(jìn)行說服動員、進(jìn)行奉獻(xiàn)精神教育外，還應(yīng)利用各種激勵方法。任何單一的激勵方式都不能有效、持久地起到激勵作用，對學(xué)生干部的激勵是一個系統(tǒng)過程，需要學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)、老師和同學(xué)共同努力并長期堅持才能真正發(fā)揮作用。首先，要了解他們的需求，結(jié)合他們的身心發(fā)展特點(diǎn)，有的放矢地激發(fā)學(xué)生干部的工作動機(jī)。不同時期的學(xué)生干部有不同的需求。因此，管理者應(yīng)從情感激勵角度出發(fā)，關(guān)心學(xué)生干部，了解并盡量滿足他們各種合理的需要。其次，給予學(xué)生干部充分的授權(quán)與肯定，用管理者的信任來激勵學(xué)生干部。研究表明，管理者的充分信任是對員工最有效的激勵方式之一。被授權(quán)的學(xué)生干部由于感受到了老師和同學(xué)的充分信任，工作便有了一定的主動性，自信心也會增強(qiáng)，在工作中就能充分發(fā)揮自身的潛能。從被動服從轉(zhuǎn)為主動合作，工作自然也會進(jìn)入良性循環(huán)。最后，完善激勵機(jī)制。學(xué)生干部在完成學(xué)習(xí)任務(wù)的同時，為工作付出了大量的時間和精力，應(yīng)該給予其一定的物質(zhì)獎勵，包括根據(jù)學(xué)生干部的表現(xiàn)發(fā)放優(yōu)秀學(xué)生干部獎學(xué)金、提供在學(xué)生組織的職務(wù)晉升和畢業(yè)優(yōu)先推薦，保送研究生加分等措施。
（四）關(guān)愛學(xué)生干部的心理健康
做好培養(yǎng)高素質(zhì)大學(xué)生干部的工作，心理素質(zhì)的培養(yǎng)是保障。大學(xué)生正處在世界觀、人生觀、價值觀逐步形成并不斷完善的階段，高校的德育工作應(yīng)注意對學(xué)生進(jìn)行積極引導(dǎo)。尤其要加強(qiáng)對學(xué)生干部進(jìn)行心理健康教育，加大其心理健康教育的宣傳普及力度。因為學(xué)生干部是一群特別需要關(guān)注的群體， 他們的工作任務(wù)比普通學(xué)生重，承受的思想壓力、學(xué)習(xí)壓力也比較大。要對學(xué)生干部的日常學(xué)習(xí)、生活以及心理給予真誠關(guān)心和愛護(hù)，經(jīng)常鼓勵和激勵他們，并及時提出努力方向和奮斗目標(biāo)，幫助他們解決實際困難與問題，讓他們在一個優(yōu)良的環(huán)境中健康地成長。要有意識地培養(yǎng)學(xué)生干部有寬闊的胸懷，團(tuán)結(jié)協(xié)作的品質(zhì)，要有較強(qiáng)的心理承受能力和自我調(diào)適能力，幫助學(xué)生干部樹立自信心和社會責(zé)任感，樹立“我能行”的理念，從而使學(xué)生干部形成良好、健康、穩(wěn)定的心理狀態(tài)。
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關(guān)鍵詞：新形勢；企業(yè)干部管理；創(chuàng)新研究
我國的經(jīng)濟(jì)體系隨著社會的進(jìn)步從計劃經(jīng)濟(jì)體系轉(zhuǎn)變?yōu)槭袌鼋?jīng)濟(jì)體系，但是，在轉(zhuǎn)變過程中，市場經(jīng)濟(jì)體系仍然殘留著計劃經(jīng)濟(jì)體系的影響。同時，我國企業(yè)干部管理存在的問題與不足使我國企業(yè)干部管理無法適應(yīng)當(dāng)前的發(fā)展形勢，由于企業(yè)干部是企業(yè)的中堅力量，這就導(dǎo)致企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益和未來發(fā)展受到影響。隨著時代不斷進(jìn)步，來自市場的挑戰(zhàn)也越來越嚴(yán)峻，對企業(yè)干部的要求越來越高，因此，我國企業(yè)干部管理體系必須要做出改變，提高我國企業(yè)干部的管理素質(zhì)，調(diào)動我國企業(yè)干部的工作積極性，這樣，企業(yè)才能緊跟市場潮流，充分發(fā)揮自身能動性，促進(jìn)自身經(jīng)濟(jì)發(fā)展，在市場中贏得一席之地。
1 我國企業(yè)干部管理的現(xiàn)狀與問題
由于采用合適的管理方法能夠充分發(fā)揮企業(yè)員工的工作熱情，提高企業(yè)員工的工作能力，保證企業(yè)平穩(wěn)快速發(fā)展，近些年我國企業(yè)對企業(yè)管理越發(fā)重視。盡管隨著市場經(jīng)濟(jì)不斷發(fā)展，我國企業(yè)的管理方式和體系都有一定進(jìn)步，但是我國企業(yè)的管理方式和體系相較于國外的先進(jìn)管理方式和體系比較落后。而企業(yè)干部管理作為整個管理較為核心的一個部分，也存在問題和不足，導(dǎo)致我國企業(yè)無法充分發(fā)揮自身的優(yōu)勢，未來發(fā)展受到阻礙。本文對我國企業(yè)干部管理的現(xiàn)狀與問題進(jìn)行分析，根據(jù)分析來做出改變，提高我國企業(yè)干部管理的能力，促進(jìn)我管企業(yè)干部自身素養(yǎng)的提高。
1.1 企業(yè)干部的素養(yǎng)無法適應(yīng)當(dāng)前社會的發(fā)展
隨著社會不斷進(jìn)步，對企業(yè)干部的素質(zhì)和能力要求越來越高，但是，一部分企業(yè)干部卻沒辦法適應(yīng)當(dāng)前社會發(fā)展的潮流，沒有大局觀，無法充分把握市場發(fā)展的方向，導(dǎo)致企業(yè)的運(yùn)行和發(fā)展受到影響。當(dāng)前，信息化和計算機(jī)技術(shù)的不斷應(yīng)用，導(dǎo)致對企業(yè)干部的信息收集和判斷的能力有一定要求。但是，由于一些企業(yè)干部卻沒辦法在短時間內(nèi)適應(yīng)技術(shù)發(fā)展潮流，使自身能力受到限制，無法充分發(fā)揮。而還有一些企業(yè)干部由于自身對工作比較懈怠，使工作相對懶散，沒有責(zé)任心，對工作沒有熱情，考慮問題也不夠全面，工作效率極低。同時，這樣的人也常常缺乏團(tuán)隊合作的精神，早已落后時展的潮流，沒有更進(jìn)一步的心，自身能力往往得不到提升。更有甚者，利用自己手中的權(quán)利中飽私囊，損害企業(yè)利益，滿足自己的私欲，導(dǎo)致企業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展被嚴(yán)重影響。
1.2 企業(yè)干部選拔任用機(jī)制存在問題
企業(yè)干部選拔任用的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該是能者居之，但是，在企業(yè)干部的選拔和任用過程中，由于操作不透明，往往企業(yè)干部的選拔和任用都無法讓員工產(chǎn)生信賴感，這就會導(dǎo)致企業(yè)員工在工作時產(chǎn)生消極情緒，打消企業(yè)員工的工作熱情，有能力的人無法得到上進(jìn)的機(jī)會。由于企業(yè)的發(fā)展往往需要高水平的人才，如果企業(yè)所需的人才無法得到相應(yīng)的重視，就會對企業(yè)的未來發(fā)展產(chǎn)生影響。而企業(yè)選拔任用機(jī)制不合理，甚至有可能會出現(xiàn)不正當(dāng)競爭，在企業(yè)干部選拔任用過程中通過其他手段導(dǎo)致沒有能力的人成為干部，同時也會導(dǎo)致企業(yè)無法正常運(yùn)轉(zhuǎn)，企業(yè)內(nèi)部極易產(chǎn)生混亂。當(dāng)企業(yè)干部選撥任用機(jī)制的公平公正原則受到侵害，不僅僅使企業(yè)內(nèi)部良性競爭受到影響，同時，也會拉低企業(yè)干部的整體水平，導(dǎo)致企業(yè)干部的能力與企業(yè)發(fā)展需求不匹配，就會阻礙企業(yè)發(fā)展。而企業(yè)員工也會對企業(yè)干部的能力產(chǎn)生質(zhì)疑，使企業(yè)的管理工作受到影響。
1.3 企業(yè)干部的培養(yǎng)方案不夠完善
當(dāng)前，企業(yè)對企業(yè)干部的培養(yǎng)不夠重視，企業(yè)的培養(yǎng)方案也存在問題，無法真正提高企業(yè)干部的專業(yè)素養(yǎng)和工作能力，無法發(fā)揮企業(yè)培養(yǎng)的真正作用，同時，也會由于企業(yè)干部的能力無法跟上時展，使企業(yè)無法把握市場發(fā)展潮流。企業(yè)干部的培養(yǎng)方案中，往往只是對理論的講解，給企業(yè)干部進(jìn)行知識補(bǔ)充，沒有落到管理實處，對當(dāng)前企業(yè)干部存在的問題進(jìn)行糾正，這就導(dǎo)致企業(yè)干部即使經(jīng)過培訓(xùn)，也無法取得進(jìn)步，存在的問題無法解決，從而影響到企業(yè)的正常工作運(yùn)轉(zhuǎn)。因此，企業(yè)干部的培養(yǎng)方案不僅僅局限在理論知識的講解上，要請專業(yè)人士對企業(yè)干部進(jìn)行針對性的培養(yǎng)，真正讓企業(yè)干部的能力得到提高，同時，也要注意調(diào)動企業(yè)干部工作的積極性，保持工作熱情，促進(jìn)企業(yè)高速發(fā)展。
2 企業(yè)干部管理的創(chuàng)新研究
由于企業(yè)干部管理過程中存在的種種問題對企業(yè)的未來發(fā)展造成一定負(fù)面影響，因此，必須對企業(yè)干部管理的相關(guān)問題進(jìn)行研究改正，確保企業(yè)內(nèi)部的良好運(yùn)轉(zhuǎn)，提高企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。以下是對當(dāng)前企業(yè)干部管理的創(chuàng)新研究，分別從企業(yè)干部管理機(jī)制、企業(yè)干部選拔任用機(jī)制和企業(yè)干部考核機(jī)制三個方面來闡述相關(guān)創(chuàng)新研究。
2.1 企業(yè)干部管理機(jī)制
首先，要加強(qiáng)企業(yè)干部對企業(yè)整體運(yùn)轉(zhuǎn)的認(rèn)識程度，同時，也要加強(qiáng)企業(yè)干部對企業(yè)的不同崗位有更深入地了解，這樣能夠培養(yǎng)企業(yè)干部的大局觀，也能加強(qiáng)不同崗位的企業(yè)干部之間的交流，使各個部門能夠得到有效地配合，提高團(tuán)隊合作和組織能力，更好地發(fā)揮企業(yè)干部的能力。與此同時，企業(yè)干部經(jīng)過相互合作，自身能力也會有得到提高。其次，在企業(yè)干部的培養(yǎng)方案中，要注意對創(chuàng)新的管理方式進(jìn)行引進(jìn)，擴(kuò)大企業(yè)干部的知識面，培養(yǎng)企業(yè)干部的創(chuàng)新意識。同時，也要根據(jù)企業(yè)干部自身能力的不足提供有針對性地培養(yǎng)，全面提升企業(yè)干部的素質(zhì)水平。最后，要建立獎懲機(jī)制，對有責(zé)任心、工作勤奮的企業(yè)干部進(jìn)行獎勵，消極怠工的企業(yè)干部進(jìn)行懲罰，保證企業(yè)干部的工作熱情。
2.2 企業(yè)干部選拔任用機(jī)制
企業(yè)的人才培養(yǎng)是企業(yè)的未來發(fā)展的基礎(chǔ)，因此，企業(yè)干部的選撥任用機(jī)制使整個企業(yè)管理的重中之重。在選拔人才時，第一要考慮到員工在實際工作中的能力和對企業(yè)的貢獻(xiàn)程度，選拔和任用有發(fā)展前景的員工，增加企業(yè)干部之間的競爭力，促進(jìn)企業(yè)干部這一隊伍的工作熱情。同時，也可以充分考察企業(yè)干部的各個方面，選擇合適的工作崗位，充分發(fā)揮企業(yè)干部的能動性。第二，企業(yè)要避免任人唯親的現(xiàn)象，給予有較高業(yè)務(wù)素質(zhì)和工作水平的企業(yè)干部更廣闊的施展空間，同時對認(rèn)真工作、能吃苦耐勞的企業(yè)干部進(jìn)行獎勵，維持他們工作的積極性。第三，企業(yè)干部的選撥任用機(jī)制要根據(jù)時展有所調(diào)整，選拔形式有所變化，確保企業(yè)干部任用選拔機(jī)制的公平公正，滿足企業(yè)對人才的需求。
2.3 企業(yè)干部考核機(jī)制
企業(yè)干部的考核機(jī)制的完善直接影響企業(yè)干部用人機(jī)制和考核機(jī)制，因此，企業(yè)干部的考核機(jī)制必須客觀系統(tǒng)。首先，要確?？己藱C(jī)制的可操作性，能夠快速便捷的對企業(yè)干部進(jìn)行考核，同時不影響正常工作運(yùn)轉(zhuǎn)。其次，要保證考核的全面性，利用多種考核方式對企業(yè)干部的能力有全面認(rèn)識。最后，根據(jù)考核結(jié)果，對企業(yè)干部的能力有準(zhǔn)確地認(rèn)識，保證企業(yè)干部任用選拔的合理性。
3 總結(jié)
在新形勢下，企業(yè)干部管理的創(chuàng)新研究有助于企業(yè)把握未來發(fā)展方向，促進(jìn)企業(yè)的經(jīng)濟(jì)發(fā)展，同時，也有利于提高企業(yè)干部的業(yè)務(wù)素質(zhì)和工作熱情，保證人才選拔任用的合理性，維持企業(yè)干部隊伍的活力。
參考文獻(xiàn)：
[1]王少華.新時期企業(yè)干部管理探析[J].企業(yè)改革與管理，2015，（14）：51-51.
關(guān)鍵詞：職業(yè)學(xué)校；學(xué)生干部；隊伍建設(shè)
一、職業(yè)學(xué)校學(xué)生干部隊伍建設(shè)的現(xiàn)狀及存在的問題
目前，絕大多數(shù)職業(yè)學(xué)校已經(jīng)建立了一系列比較完整的職業(yè)學(xué)校學(xué)生干部隊伍培養(yǎng)建設(shè)體系，培養(yǎng)出了一大批優(yōu)秀的學(xué)生干部骨干和先進(jìn)分子。他們在學(xué)習(xí)之余，主動服務(wù)同學(xué)老師，積極參與學(xué)生管理工作，有效地起到了橋梁和紐帶作用，獲得老師與同學(xué)的認(rèn)可，保證了學(xué)生工作的順利開展。
（1）學(xué)生干部任職時間短，缺乏培訓(xùn)。職業(yè)學(xué)校的學(xué)生在校學(xué)習(xí)時間較短，這就造成了在培養(yǎng)學(xué)生干部上的局限性。學(xué)生干部換屆頻繁，任職時間短，導(dǎo)致工作沒有延續(xù)性，并且無法接受系統(tǒng)科學(xué)的培訓(xùn)。
（2）學(xué)生干部監(jiān)督考核制度不健全。有些職業(yè)學(xué)校對學(xué)生干部組織沒有有效的內(nèi)部考核監(jiān)督體系，考核的內(nèi)容也比較簡單和籠統(tǒng)，考核方式不靈活，缺乏針對性和科學(xué)性。對學(xué)生干部進(jìn)行考核監(jiān)督的也主要是從事學(xué)生管理工作的教師和學(xué)生干部隊伍內(nèi)部的相關(guān)部門成員，這就使得對學(xué)生干部的考核監(jiān)督摻雜著主觀性，缺乏威懾力。
（3）部分學(xué)生干部工作積極性不高，缺乏團(tuán)隊精神，不能吃苦耐勞?，F(xiàn)在的職業(yè)學(xué)校學(xué)生都是“90后”，且大多數(shù)是獨(dú)生子女。學(xué)生比較注重個體，所以在學(xué)生干部中會有一部分人習(xí)慣了以自我為中心，抗壓能力弱，忽視團(tuán)隊合作，不能相互配合，換位思考，甚至相互推諉，互相指責(zé)，缺乏團(tuán)隊協(xié)作精神。
（4）部分學(xué)生干部對自身身份出現(xiàn)認(rèn)知偏差，存在功利思想。部分學(xué)生對學(xué)生干部的身份理解出現(xiàn)認(rèn)知偏差，動機(jī)不純。他們不是為了服務(wù)同學(xué)，配合老師開展工作，鍛煉自身能力，而是利用學(xué)生干部身份滿足自己“當(dāng)官”的虛榮心、為自己牟私利。
二、加強(qiáng)學(xué)生干部隊伍建設(shè)的方法與對策
（1）完善創(chuàng)新學(xué)生干部隊伍培訓(xùn)培養(yǎng)機(jī)制。學(xué)生干部是學(xué)生自我管理和校園文化建設(shè)的重要力量，職業(yè)學(xué)校應(yīng)該高度重視加強(qiáng)學(xué)生干部的培訓(xùn)工作，建立健全學(xué)生干部培養(yǎng)體系。培訓(xùn)內(nèi)容包括理論知識、業(yè)務(wù)技能和職業(yè)素質(zhì)等；培訓(xùn)方式可以采取社會實踐課、研討會、課堂案例教學(xué)、報告會、業(yè)務(wù)交流會等形式；培訓(xùn)師資可以請校內(nèi)外優(yōu)秀的思想政治、心理學(xué)和學(xué)生管理崗位的教師，也可以讓優(yōu)秀的學(xué)生干部介紹經(jīng)驗心得。
（2）建立完善有效的學(xué)生干部考核監(jiān)督制度。必要的考核監(jiān)督不僅是對學(xué)生工作負(fù)責(zé)，也是對學(xué)生干部負(fù)責(zé)。對保障學(xué)生的權(quán)益、規(guī)范學(xué)生干部的行為具有重要作用?？己藘?nèi)容應(yīng)該全方位，包括思想品德、工作業(yè)績、學(xué)習(xí)成績等各方面；考核方式可以短期與長期相結(jié)合、隨機(jī)與定期相結(jié)合、書面與口頭相結(jié)合、動態(tài)與靜態(tài)相結(jié)合。只有加強(qiáng)及完善制度體系建設(shè)，通過嚴(yán)格的考核監(jiān)督，才能讓每位學(xué)生干部既有壓力又有動力，既能發(fā)揮主動性又能自我約束。
（3）提高學(xué)生干部的工作積極性，樹立團(tuán)隊合作意識，培養(yǎng)吃苦耐勞精神。要從思想品德、工作責(zé)任心、能力素質(zhì)、服務(wù)奉獻(xiàn)精神、團(tuán)隊合作意識、受同學(xué)歡迎程度等方面對學(xué)生干部的選拔和任用進(jìn)行綜合考察，并嚴(yán)格按照民主選拔程序來選拔干部。組織團(tuán)隊活動，樹立團(tuán)隊意識，保持艱苦奮斗的作風(fēng)，培養(yǎng)吃苦耐勞精神。
（4）充分發(fā)揮校園文化的引領(lǐng)作用，培養(yǎng)學(xué)生干部正確的人生觀、價值觀、世界觀。良好的校園文化是一個學(xué)校的靈魂，積極健康、團(tuán)結(jié)向上、豐富多彩的校園文化對提高學(xué)生干部的思想道德素質(zhì)，對培養(yǎng)他們的人生觀、價值觀、世界觀有著潛移默化的影響。通過學(xué)生干部思想教育會議、小組專項討論、老師單獨(dú)談話等形式，對學(xué)生干部宣講思想政治，使學(xué)生干部認(rèn)識到學(xué)校和老師同學(xué)對思想觀念的重視，從而培養(yǎng)良好的思想品德。
參考文獻(xiàn)：
